cDNA第二链合成试剂盒

特别提示：包括cDNA第二链合成试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：cDNA第二链合成试剂盒
英文名称：Second Strand cDNA Synthesis Kit

产品货号：cDNA第二链合成试剂盒
产品规格：30次

cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链。

产品特点：
1. 即开即用，含有合成cDNA第二链的所有试剂。
2. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。

试剂盒组成：

成分	规格
5×cDNA第二链合成缓冲液	480μl
20×cDNA第二链合成酶混合液	120μl
0.2 M EDTA溶液	120μl
超纯水	2ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
一、合成cDNA第一条链
本试剂盒不提供cDNA第一链合成试剂，用户需自备相关试剂合成cDNA第一链。
二、合成cDNA第二链
1.在冰浴上向已经完成合成cDNA第一条链的反应体系中依次加入下表试剂：

成分	用量
cDNA第一链合成反应液	10μl
超纯水	48μl
cDNA第二链合成缓冲液	16μl
cDNA第二链合成酶混合液	4μl
轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温2小时
自备的T4 DNA聚合酶	2μl
轻柔吹打混匀后，16℃继续保温30分钟
0.2M EDTA溶液	4μl

注：如果不需要将双链cDNA平末端化，则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μl检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片，则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常，需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等实验。

除了cDNA第二链合成试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：


BTN90805 即用型PCR试剂盒(含染料) 1ml×10|5mL×20
BTN60906 cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒) 50次
BTN130833 LAMP可见光染料 1mL
WE0100 PCR Mix(含染料)(滴瓶装) 5ml
WE0123 高效热启动DNA聚合酶 500U|2500U
ALH195 一步法荧光定量RT-PCR试剂盒 50μl×50次|50μl×100次
SY0038 热启动高保真酶 100U
SY0044 脱氧鸟苷三磷酸溶液(100 mM)(dGTP) 400ul
JN0036 2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix 1ml×5
JN0059 UDG酶 200U
HQF11 全血免抽提直接PCR试剂盒 100次/500次/1000次
MT0018 5×Real-Time qPCR MasterMix(TaqMan探针法) 20μl×100次|20μl×500次
GL1303 明胶水溶液(2%,PCR级) 50ml