膜结合DNA清除试剂盒厂商

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博供应的膜结合DNA清除试剂盒厂商用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多膜结合DNA清除试剂盒等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：膜结合DNA清除试剂盒厂商
规格：50次
产地：国产|进口
编号：BTN90904
英文名：Membrane-Bound DNA Scavenger
本试剂盒是在无RNase的DNase(BTN90903)的基础上开发的、专门用于在柱式法总RNA抽提过程中，清除硅胶膜上基因组DNA污染的产品。

产品特点：
1.快速，反应条件经过优化，能在5分钟内使硅胶膜上的基因组DNA降解。
2. 不含RNase，可以保证RNA分子完整性不受任何影响。
3. 兼容性广，跟大多数柱式RNA提取试剂盒兼容，可以直接整合进去。不需要在提取到总RNA后再单独去除里面的DNA污染。

试剂盒组成：

 

成分	规格
RNase-free DNase(1U/μL)	0.5ml
膜反应液	2.5ml
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存，通用洗柱液和RNA 洗脱液可以室温保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将0.5mL 通用洗柱液加入到已经结合了DNA和RNA的硅胶膜离心吸附柱中，12000rpm室温离心10-30秒。注意：不能使用离子交换吸附柱，Qiagen公司的部分产品使用的是离子交换吸附柱，一部分是硅胶膜离心吸附柱，一定要在实验前弄清楚。
2. 配制DNase工作液50μl，即将10μl RNase-free DNase 加入到50μl膜反应液中，在离心管中吹打混匀。注意：对一般的mini型离心吸附柱，膜反应液和DNase的总体积不要大于60μl，否则酶的浓度将降低，影响DNA去除效果。
3. 将上步得到的混合液全部转移到第一步预洗得到的离心吸附柱中。
4.室温放置5分钟。注意：5分钟一般足够降解大多数情况下的DNA污染。如果DNA没有彻底降解(可能由于样品中残留的杂质抑制了DNase的活性)，此步的保温时间可以适当延长，直到彻底清除为止。
5. 保温结束后，直接在离心管中加入0.5mL的通用洗柱液，12000rpm室温离心10-30秒。
6.干甩一次(12000rpm室温离心10-30秒)。
7. 将30-100μl RNA 洗脱液加入到离心吸附柱的膜中央，12000rpm室温离心10-30秒，洗脱液即是无DNA的RNA样品。可以立即使用或放-70℃长期保存。

膜结合DNA清除试剂盒厂商极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·嗜热菌蛋白酶
编号：BTN131028
英文名称：Thermolysin
规格：25mg
嗜热菌蛋白酶是一种热稳定的金属蛋白酶。高消化温度可作为一种选择性的变性剂，促进抵抗蛋白水解的蛋白的消化。嗜热菌蛋白酶优先在疏水性的*基酸残基的N末端进行剪切，包括亮*酸、*丙*酸、缬*酸、异亮*酸、丙*酸和甲硫*酸。其最佳消化温度范围在 65–85℃之间。嗜热菌蛋白酶活性的最佳pH值范围为5.0～8.5。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·细胞核微量制备试剂盒
编号：BTN100601
英文名称：Nuclei Miniprep Kit
规格：50次
用高密度介质来分离动物软体组织(如肝脏、脾脏等)细胞核是目前主流的方法，它是由Chauveau于1956年发明，其原理是细胞核的密度较大，在高速离心条件下(40000g 1小时)可在高密度介质(2.2mol/l 蔗糖溶液)中沉降下来，从而达到与细胞质其它成分分开的目的。该方法能通过一步离心得到较高纯度的细胞核，得到广泛应用。本产品就是在Chauveau方法的基础上优化改进而来。

产品特点：
1．基于密度梯度分离，可有效去除细胞质及其他细胞器，得到的细胞核纯净。
2．加进*化*、*化*、*化*(代"*")等改变分离介质渗透压的物质，减少了细胞核的脆性，增加了细胞核的完整性。
3．精心调节了介质的pH，防止细胞核在分离过程中的聚集，还能保持细胞核的精细结构。
4．快速，整个操作过程仅需1小时即可完成(对一个样品而言)。
5．提供染色试剂，可以在普通光学显微镜下检测纯化的细胞核的纯度。
6．处理温和，得到的细胞核中的大部分蛋白质都具有活性，可以用于胶迟阻实验、酶活性分析细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究；也可用于超大片段DNA的纯化。
7．不但适用于动物和植物培养细胞，还能用于实体组织(能用Dounce或Potter 匀浆器匀浆的组织均可)。
8．一次微量提取足够处理0.1 克组织或10E7个培养细胞，本产品足够50次微量提取。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A成分一	100ml
溶液A成分二(干粉)	约20g
溶液B成分一	50ml
溶液B成分二(干粉)	约100g
细胞核染色液	1套
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

一、准备工作：先将溶液A的成分二(干粉)全部加入到溶液A成分一(溶液)中，摇晃溶解后得到100mL溶液A。将溶液B的成分二(干粉)全部加入到溶液B成分一(溶液)中，摇晃溶解后得到50mL溶液B。4℃放置不能超过2 天，长期放置需要放-20℃。

二、微量细胞核分离(放量提取各试剂的用量可以按比例放大)：
1．对组织细胞：称取100～200mg 新鲜组织(如动物肝脏、脑、心肌和植物叶片等)，用自备的PBS或生理盐水洗净血水，滤纸吸干，用剪刀或刀片将其剪为碎块(最好大小为1cm3，过小反而不利于匀浆)放入小容量Dounce或Potter 玻璃匀浆器内。
2．对培养细胞：用自备胰酶按标准方法消化培养细胞，PBS 洗涤，800×g 5～10分钟离心收集细胞，计数。每次微量提取需要5×10E7个细胞，加入1.0mL预冷的溶液A重悬细胞，然后转移到小容量Dounce或Potter 玻璃匀浆器内
3．用Dounce或Potter 组织匀浆器在冰上破碎组织或细胞。如果用手动匀浆器，一般需要20～30次。如果用电动匀浆器，一般需要处理3-5次，每次5～10秒钟(转速为500r/min)。
4．将匀浆液转移到离心管中。如果匀浆液有可见的结缔组织和未破碎的组织块，可以用三层自备的纱布放在1.5mL离心管管口，将匀浆液过滤进入离心管。可取少量滤液涂在载玻片上制得涂片A，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
5．4℃，700-800×g 水平离心5-10分钟。细胞核沉淀在收集管底部，弃上清。可取少量上清液涂在载玻片上制得涂片B，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
6．加入0.5mL预冷溶液A重悬沉淀。用预冷的匀浆器(用前需要将表面的组织洗去)重悬沉淀。可取少量上清液涂在载玻片上制得涂片C，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
7．在水平型离心管中加入0.5mL预冷的溶液B，然后靠管壁慢慢加入上步得到的重悬液。
8．在4℃ 23000g离心30分钟，管底的沉淀即为细胞核。
9．小心吸弃上清液。注意：上清一般比较粘稠，最好倒立一段时间。
10．用0.5mL溶液A重悬沉淀。
11．在4℃ 1500g离心5分钟，吸弃上清，沉淀即为纯净的细胞核。可以直接使用，也可以加等体积的自备甘油，混匀后放液氮或-70℃保存。可取少量上悬浮液涂在载玻片上制得涂片D，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
12．用本方法一般可以从0.1g 肝脏组织中纯化到1-2×107个细胞核。如果后续试验是Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入上样缓冲液裂解细胞核后上样。

三、显微镜检测涂片，计算效率
1．将干燥后的A-D 四张涂片加入固定液固定15分钟，晾干。
2．Giemsa 染液染10分钟。
3．自备蒸馏水漂洗数秒，用滤纸吸干水。
4．用显微镜(40×)检查涂片，细胞核将呈紫红色，混杂的细胞质为浅蓝色碎片。根据每步细胞核的数量可以粗略估计回收效率。

疑难解答：
本说明书强烈建议用离心力g 而不是转速计算所需的离心速度，因为不同的离心机转子直径不同，即使是同一转速，其离心力也不同。如果只知道转速，可用下式计算离心力。
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２
G为离心力，一般以g(重力加速度)的倍数来表示；[rpm]２即转速的平方；
R为离心机转子的半径(单位为厘米)。


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Quant qRT-PCR kit (SYBR Green) 
25535-16-4 Propidium Iodide 碘化丙啶
H1401 小鼠血浆(去红细胞、无菌过滤)
pLB零背景快速克隆试剂盒(不含MCS） 
ARB12000 大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)酶联免疫定量检测 Rat P-Selectin ELISA KIT
A0101 胎牛血清(无菌采制)
5-乙酰基-2-*吡*(代"啶") Ascorbyl palmitate 139042-59-4
DL-高半胱*酸 Ferrosoferric oxide 454-29-5
NTE缓冲液(1×,pH7.4)   100ml
BTN131232 壮观霉素溶液 Spectinomycin Solution
莫能菌酸* CMS 22373-78-0
NF-235 兔抗人IgA血清
BFD056 黄曲霉毒素B1快速检测卡
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BL1391 SABC山羊IgG-POD kit
PY02-181  山梨醇麦康凯琼脂基础  250克  
001003 绵羊血清
D-天冬酰胺一水物 Chlorosulphonphenol S 2058-58-4或5794-24-1
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87-79-6 L-山梨糖
阿维菌素 Oligomycin 71751-41-2
ARB12740 小鼠I型胶原交联羧基末端肽(ICTP)尿液中含量检测 Mouse cross-linked carboxy-terminal teloPeptide of type i collagen,ictp ELISA KIT
鞭毛染色液(改良Ryu法)   50ml|100ml
ARB11913 人鳞状上皮细胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA代测服务 Human squamous cell carcinoma antigen 2,sccag 2 ELISA KIT
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水杨酸*酯 5-HIAA 118-55-8
甘*酸* D-Serine 35947-07-0
NF-203 羊抗人Fg血清
ARB11741 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA检测服务 Human mammalian target of rapamyein,mtor ELISA KIT
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ARB13012 小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)含量测试 Mouse anti-thrombin Ⅲ,at-Ⅲ ELISA KIT

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