利福平溶液 克隆与表达

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

利福平溶液 克隆与表达的品牌：百奥莱博，是优质的克隆与表达产品，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多利福平溶液等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：利福平溶液 克隆与表达
规格：10mL
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Rifampicin Solution
本产品为浓度为100mg/mL的利福平溶液(溶剂为DMSO)。利福平(甲哌利福霉素；3-(4-甲基-1-哌*(代"嗪")基亚胺甲基)利福霉素SV；Rifampin；Rifamycin AMP)，分子式：C43H58N4O12，分子量：822.94，CAS号：13292-46-1。利福平是从利福霉素B得到的一种半合成抗生素，能抑制细菌DNA转录合成RNA，可抑制成熟病毒粒子DNA和蛋白质的合成，是细菌核糖核酸聚合酶的特殊抑制剂，可用于治疗结核病、肠球菌感染等。除作为抗生素应用外，在分子生物学中可用做从细菌中去除质粒的试剂利福平。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期6个月。

想要了解更多关于利福平溶液 克隆与表达的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：
ARB12678 大鼠睾酮(T)elisa测定使用说明书 Rat testoterone,t ELISA KIT
334-50-9 Spermidie 3HCL  亚精胺三盐*(代"酸")
ARB14271 猪免疫球蛋白M(IgM)血清中含量检测
碱性磷酸酶封闭液(Levamisole法)   100ml
4-*基-3-肼基-5-巯基-1,2,4-三氮唑 CAPSO 1750-12-5
ARB11048 人表皮角蛋白(EK)Elisa分析 Human epidermal keRatin,ek ELISA KIT
ARB11737 人靶向核糖核酸酶(TR)Elisa方法检测 Human targeted ribonuclease, tr ELISA KIT
α-*异丁酸 (±)-Propranolol hydrochloride  2052-01-9
BL1350 低分子量蛋白MARKER
荧光示踪灌注固定液   500ml
ARB14165 牛口蹄疫A型抗体(FMD-A-Ab)酶免分析 
ARB13889 猪孕激素/孕酮(PROG)血清中含量检测 Porcine progesterone,prog ELISA KIT
BPTE电泳缓冲液(1×,RNase free)   500ml
ARB13562 兔子可溶性P选择素(sP-Selectin)代做ELISA实验 Rabbit soluble P-Selectin,sP-Selectin ELISA KIT
HC0050 吸头(长)
CYB163023 羊抗人纤维蛋白原-FITC
ARB10419 人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)含量检测 Human hepatitis c virus igm,hcv-igM ELISA KIT
粘蛋白 PTSA 84195-52-8
邻甲*(代"酚")酞指示剂   100ml
ARB11385 人活化素A(ACV-A)代做ELISA实验 Human activin a,acv-a ELISA KIT
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·一站式Blue Native PAGE电泳套装
编号：BTN120642
英文名称：One-Stop Blue Native PAGE Pack
规格：30次

·B-5固定液
编号：BTN140587
英文名称：B-5 Fixative Solution
规格：250mL
B-5固定液为骨髓活检常规固定液，也常用于淋巴组织的固定。其主要成分为*化汞、醋酸*、甲醛等。固定时间2-4小时。经过固定的标本保留在10%福尔马林或70%乙醇中。 B-5固定液固定的组织切片含有汞沉淀在染色前必须进行脱汞处理。
注：固定过程中不要使用任何金属用具或金属类盖子。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

·Western印迹膜封膜液(NC膜和PVDF膜)
编号：BTN81210
英文名称：Western Blot Blocking Buffer
规格：250mL
Western Blot实验中，为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体IgG等)发生非特异性吸附，导致实验结果不清晰，在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。无蛋白封闭液可最大限度减少交叉反应引起的非特异性背景。本产品可快速高效地封闭膜上多余的结合部位，减少非特异结合情况的产生，降低背景，适用于各种转印膜的封闭。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

·柱式腐殖酸清除剂
编号：BTN60801
英文名称：Column Humic Acid Scavenger
规格：30次
用绝大多数文献报道的方法从土壤或湖海沉积物中提取的DNA都含有棕黑色或黑色的腐殖酸的污染，用百奥莱博的土壤DNA提取试剂盒从泥碳(腐殖酸含量超过50%)等腐殖酸丰富的土壤样品中提取的DNA也有腐殖酸污染，它们往往对PCR等后续反应有极大的抑制作用。本产品专门用于从土壤DNA样品中清除腐殖酸污染。

产品特点：
1.去污染效果好，能使腐殖酸的浓度降低10倍以上。
2.DNA回收率高，一般都在80%以上。
3.操作过程简单快速，只需要10分钟。
4.扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
5.处理后的样品原液或稍微稀释后即可用于PCR。

试剂盒组成：

 

成分	规格
专用上柱液	9ml
离心吸附柱	30套
通用洗柱液	30ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1.将0.3mL专用上柱液与50μl或50μl以下的含腐殖酸的DNA溶液轻柔混匀。如果DNA溶液体积超过50μl，专用上柱液的体积需按1:6(DNA溶液:专用上柱液)的比例相应增加。不要剧烈震荡，否则DNA容易断裂。
2. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中，套上收集管，放于离心管架上，静置3～5分钟，12000～15000g离心1分钟并倒掉收集管中的液体。若一次加不完，可分两次加入并离心。
3. 加入0.5mL通用洗柱液于离心柱中，12000～15000g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。
4. 重复第3步操作1次。
5. 12000～15000g离心1分钟以去除离心柱中的残留液体。
6. 将离心柱置于一新的干净的离心管(自备)中，加入50μl通用洗脱液，静置3～5分钟，12000～15000g离心1分钟。
7.离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。

使用效果：

图注：从泥碳(腐殖酸含量大于60%)中提取的DNA用本产品处理前(B)和处理后(A)的颜色对比。处理前OD340为4.0(4为所用分光光度计的上限，实际读数可能远高于4)，处理后降低到0.3。处理前的原液、10倍和100倍稀释液均无PCR扩增，而处理后均可以扩增。

疑难解答：
Q: 如何判断提取的DNA没有腐植酸污染？
A：方法一是目测法，即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色，说明可能是少量残留的未除尽的腐植酸。方法二是检测最大光吸收。注意：有腐植酸污染并不表示DNA不能使用，有的腐殖酸并不抑制PCR扩增。
Q: 腐殖酸的最大吸收波长是多少？
A：腐植酸(humic acid)是一大类呈棕黑色或黑色的物质,其结构千差万别，土壤中腐殖酸的组成和特点随土壤不同而不同，所以其最大吸收波长也各不相同。有的土壤的腐殖酸的最大吸收波长在260nm(见Appl. Environ. Microbiol.，63：4993，1997)，有的则在340nm，所以用特定的波长测定OD值时波长的选定要根据土壤而决定。Sigma，Fluka等公司出售的腐植酸产品成分一般比较简单，其最大吸收波长不能推广到成分更为复杂的土壤腐殖酸样品。
Q:是否腐植酸都会抑制后续的DNA反应？
A：否，因为腐植酸是一大类物质的统称，他们的结构和特性各不相同，所以是否对后续反应有影响最好通过实验来验证。如果用提取的DNA溶液原液进行反应而反应没发生，而对照样品(已知的不含污染的DNA)能够发生，说明可能有抑制作用。
Q：除本方法外，还有什么有效方法去除DNA样品中的腐植酸？
A：可以先电泳，然后用超大片段胶回收试剂Magic Gel DNArc(BTN60706)纯化DNA，如此得到的DNA原液一般可以直接扩增。
Q：本产品与柱式DNArc有何区别？
A：本产品由柱式DNArc改进而来，主要区别一是使用了不同的上柱液，减少了硅胶膜对DNA的非特异吸附，更适用于微量DNA样品；二是上柱液中含有腐殖酸去除试剂，适合于土壤DNA样品。
Q：在用土壤DNA进行细菌专一性PCR时，为何没加DNA模版的阴性对照有扩增产物出现？
A：这是由于使用的Taq DNA聚合酶一般从E.coli表达菌株中提取，提取过程中污染了E.coli的基因组DNA，而使用的广谱细菌专一性引物可以识别所有细菌DNA基因组DNA模版，所以会产生扩增。建议使用高质量的Taq DNA聚合酶。


利福平溶液 克隆与表达关键词：Rifampicin Solution,利福平溶液,13292-46-1


·X-gal溶液
编号：BTN80910
英文名称：X-Gal Solution
规格：10mL
本产品为浓度为20mg/mL的无色液体。X-Gal是E.coli β-半乳糖苷酶的底物，水解后呈现蓝色。其原理如下：

由于许多常用的克隆质粒载体的多克隆位点都是通过定点诱变的方法被安置在lacZ基因中，所以如果在培养基中加入IPTG诱导剂和X-Gal，则就可以根据菌落的颜色判断菌落中质粒是否携带插入片段(克隆成功与否)。

储存条件：低温运输、-20℃避光保存、有效期一年。

·动物细胞裂解液A(非变性)
编号：BTN80807A
英文名称：Animal Cell Lysis Solution(A)
规格：100mL
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分，可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞，使之释放出细胞内蛋白，用于后续实验。

产品特点：
1.快速裂解，多种裂解成分经过精心优化，能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能最大程度地保留蛋白天然结构和功能，主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀，还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高，主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验，还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

注意事项：
1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶抑制剂复合物，可以更有效地抑制蛋白酶活性，防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究，最好在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶抑制剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响，因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。

使用方法：

一：处理贴壁的培养细胞
1. 去除贴壁细胞培养液，用冰浴预冷的PBS 洗两遍，去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
 注意：裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1～2×106细胞)需要0.1～0.2mL本产品；25 cm2培养瓶(3～6×106细胞)需要0.3~0.6mL；75 cm2培养瓶(1～2×107细胞)需要1～2mL。对于特别大或特别小的细胞，需要用户摸索最佳用量。
4. 冰上放置10-30分钟(最佳时间跟细胞系相关)，其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端，并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。
7. 用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

二：处理悬浮细胞
1. 400×g，4℃离心10分钟收集悬浮细胞，弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍，步骤同第一步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品，充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞，期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀，最好留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。
7. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

三：处理组织块
1. 称量组织块，用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆，用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中，1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品，吹打混匀，放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次，共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。
6. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

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