北京现货小牛胸腺DNA溶液供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应北京现货小牛胸腺DNA溶液供应，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京现货小牛胸腺DNA溶液供应
编号：BTN131207
品牌：百奥莱博
英文名：Calf Thymus DNA Solution
产地：国产|进口
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链小牛胸腺DNA溶液，可以用于Southern、Northern预杂交，还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用，非常方便。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

欲了解更多北京现货小牛胸腺DNA溶液供应的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:

·Western印迹膜抗体清除剂
编号：BTN80813
英文名称：Western Blot Antibody Scavenger
规格：200mL
在Western膜上完成了一抗二抗结合和后续化学发光检测后，往往还需要检测Actin和Tubulin等表达相对稳定的内参蛋白质或其他蛋白。本产品可以使膜上的、与靶蛋白质结合的一抗二抗从膜上脱落，这样同一张膜可以用于不同的检测反应，比重新跑一块SDS-PAGE更省时省力，同时数据间可比性更强。

产品特点：
1．简单快速，整个过程只需要20分钟。
2．不破坏膜上的蛋白抗原，不导致蛋白信号的减弱。
3．无DTT和b-巯基乙醇等成分，无异味。
4．可以反复使用2-4次。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1．将印迹膜浸入Western 印迹膜洗膜液(BTN81211)中，然后放入杂交袋中。如果本产品中提供的杂交带赠品大小不合，则需要自备大小合适的杂交袋。
2．加入30-50mL本产品(具体加入的量根据杂交袋大小决定)，然后热封口。
3．在 50℃水浴中保温30分钟，每10-15分钟手动摇晃杂交袋一次。
4．保温结束后小心取出杂交袋，剪掉一角，将本产品倒入塑料瓶中，4℃密封保存(本产品可以反复使用3-5次)。
5．将印迹膜放入干净托盘中，加入足够Western印迹膜洗膜液(以覆盖住膜表面为准)，在摇床上轻柔摇晃3～5分钟。如此重复三次。如果洗涤三次后印迹膜上还有残留的巯基乙醇味道，则应该继续清洗直到没有味道为止。
6．将印迹膜浸入甲醇原液中30秒。
7．取出后在滤纸上放置15分钟。
8．立即用于后续的Western杂交或包在保鲜膜中在4℃长期保存。

·DNA Shuffling试剂盒
编号：BTN131178
英文名称：DNA Shuffling Kit
规格：10次
DNA Shuffling即DNA分子的体外同源重组，它是一种分子水平上的定向进化(directed evolution)技术，它以一个或多个基因为起始材料，通过先随机断裂成小片段，再进行互为模板和引物的PCR(无外加引物)，最后再进行常规PCR(外加引物)等处理，最后得到含有大量DNA重组突变的PCR产物。其原理示意图如下：


产品特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，无需单独准备各成分。
2.操作手册经过优化，1-2天即可完成，节省大量优化时间。
3.本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

试剂盒组成：

 

成分	规格
PCR Mix 3.0，2×	1.5mL
DNase I溶液(1U/μL)	10μl
溶液A，10×	60μl
溶液B，10×	60μl
超纯水	1mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限一年。

使用方法：
1.待突变基因片段的制备：待突变基因片段可以用含此基因的质粒为模板、用PCR法或酶切法制备。制备时需保证含此基因(或此基因的一部分)的DNA片段总长度不要超过1kb，同时比DNA shuffling终产物(第二轮PCR产物)长200-400bp。每次DNA Shuffling实验至少需要2μg起始DNA片段(如果含几个基因片段，则彼此的比例为1:1)，并且必须通过胶回收的方法回收，以便彻底去除残留的质粒模板、引物和非特异扩增产物等。最后需用分光光度法准确定量。
2.提前准备37℃和75℃水浴，同时新鲜配制0.1U/μL的DNase工作液放冰上待用(必须在用时才配制，方法是将1μl 本试剂盒提供的1U/μL的DNase I溶液和1μl溶液A和8μl超纯水混合)。此溶液需在24小时内使用。
3.在一个离心管中，按顺序加入下列成分：

成分	用量
待突变基因片段(第1步制备)	2μg
溶液A	5μl
溶液B	5μL
DNase I工作液(第2步制备)	2μL
超纯水	36μL

4.充分轻柔吹打混匀后37℃水浴8分钟，然后立即放75℃水浴处理10分钟以灭活DNase I。
5.在2-3%琼脂糖凝胶上电泳，用常规的胶回收法回收25-150bp范围的所有片段待用。注意：一定要加合适的DNA marker以便确定片段范围，最好使用本公司生产的绿如蓝核酸染料(可见光型)作为电泳染料以避免用UV照射DNA，否则UV使DNA发生的交联将极大降低后续扩增效果。
6.分光光度法精确测定回收片段的浓度。
7.在PCR管中按顺序加入0.5μg上步回收得到的回收片段、50μl 2×PCR Mix、加超纯水到100μl。
8.按下面的PCR反应参数进行第一轮无引物PCR：

过程	温度	时间
PCR前变性	94℃	150s
PCR反应(40循环)	94℃	30s
	47.5℃	45s
	72℃	10s，每次循环后增加5s
PCR后延伸	72℃	10min

9.取5-10μl进行电泳检测，然后进行PCR回收，得到第一轮PCR产物。
10.将回收的第一轮PCR产物1μl原液作为模板设置3管第二轮PCR反应。

成分	用量
回收的第一轮PCR产物	1μL
PCR Mix 3.0，2×	50μL
自备DNA Shuffling引物	各1μM
超纯水	加水到100μL

11.按下列PCR参数进行第二轮PCR。

过程	温度	时间
活化	94℃	150s
PCR反应(25次循环)	94℃	30s
	47.5℃	45s
	72℃	60s，每次循环后增加5s
PCR后延伸	72℃	10min

12.电泳检测，回收预期大小的PCR产物，用于后续的构建克隆文库实验(略)。

疑难解答：
Q：易错PCR和DNA Shuffling有何区别？
A：前者引入的是点突变，后者引入的是重组突变。示意图如下：



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·T4 DNA连接酶
编号：BTN60609
英文名称：T4 DNA Ligase
规格：200U
T4 DNA连接酶从表达T4 gene 30的E.coli细胞中分离纯化而得，由一个分子量为68KDa的单亚基组成。

产品用途：
1．催化连接反应，即dsDNA，dsRNA和DNA/RNA分子的粘性末端和平末端5´-P末端和3´-OH末端之间形成磷酸二酯键。
2．修复dsDNA反应中的切口(Nick)。
3．催化pyrophosphate和ATP之间的磷酸交换反应(Weiss酶单位定义原理)
4．需要ATP、Mg2+和DTT，最佳pH为pH7.5-8.0。
5．NaCl浓度在200mM以上时有抑制作用。
6．1%～10%PEG和150～200mM NaCl能促进连接反应(尤其是平末端DNA)效率。

产品组成：

成分	规格
T4 DNA连接酶(5U/μL)	40μl
10×T4连接酶Buffer	300μl
说明书	1份

注意：本公司本产品的单位按Weiss 单位定义，200个Weiss单位相当于25000个连接单位，1000个Weiss 单位相当于125000个连接单位。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：(DNA片段和载体DNA的连接)
1．在微量离心管中制备下列连接反应液

10×T4 DNA Ligase Buffer	2.5μl
自备插入DNA片段	约0.3pmol
自备载体DNA	约0.03pmol
T4 DNA Ligase	1μL
dH2O	up to 25μL

2．16℃过夜反应
3．加入2.5μL的3M醋酸*(PH5.2)
4．加入62.5μL的预冷无水乙醇，-20℃放置30-60分钟
5．离心回收沉淀，用70%的预冷无水乙醇清洗沉淀，真空干燥
6．25～50μL TE溶解，10-20μL转化至100μL感受态细胞中。


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ARB13216 小鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)Elisa方法检测 Mouse matrix metalloproteinase-9,mmp-9 ELISA KIT
邻菲啰啉 Gemcitabine 5144-89-8
H0801 绵羊血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
网织红细胞染色液   50ml|100ml
9005-84-9 可溶性淀粉 Starch potato soluble
SJ0091 Ciprofloxacin 环丙沙星
ARB12279 大鼠纤溶酶原激活物抑制物(PAI)elisa检测说明书 Rat plasminogen activator inhibitor ELISA KIT
ARB10018 人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)检测服务 Human 28s ribosome rnp antibody,28s rrnp ELISA KIT
ARB10806 人抗甲状腺微粒体抗体(ATMA/TMAB)ELISA代测服务 Human anti-thyroid microsome antibody,atma/tmab ELISA KIT
左氧*沙星 2,6-Di-O-methyl-β-cyclodextrin 100986-85-4
ARB12546 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)Elisa方法检测 Rat insulin-like growth factor binding protein 4,igfbp-4 ELISA KIT
但马胶 Saponin 9000-16-2
PY04-071  柠檬酸铁铵  0.1125g/支×10支  每支添加于225mlFraser增菌液中制成FraserⅠ培养基，用于李斯特氏菌选择性增菌培养
尼罗蓝指示剂   100ml
1003-85-0 L(+)鼠李糖
CYB162004 兔抗人纤维蛋白原(抗血清) 0.5ml
伊文思蓝染色液(0.5%)   100ml
69-78-3 DTNB 5,5二巯基-2,2-二硝基*(代"*")甲醛
37326-33-3 Hyaluronidase   透明质酸酶
BTN60403 红细胞裂解液A型(核酸纯化) Red Cell Lysis Solution ,Type A
ARB12915 小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)Elisa分析 Mouse leukemia inhibitory factor receptor,lifr ELISA KIT

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