柱式动物RNA大量提取试剂盒现货供应

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百奥莱博专业生产供应柱式动物RNA大量提取试剂盒现货供应，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：柱式动物RNA大量提取试剂盒现货供应
编号：BTN80901
英文名：Animal RNA Column large-scale extraction kit
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本试剂盒是柱式动物RNA提取试剂盒(BTN71201)的大提升级产品，可用于从各种动物组织(包括白细胞)中大规模快速提取总RNA。跟柱式动物RNA提取试剂盒相比，其主要特点是：
1.大规模提取，一次最大可以提取到80-100μg的动物总RNA。
2. 操作简单快速，整个过程只需要不到二十分钟(对一个样品而言)。
3. RNA 纯度更高，OD260/OD280一般在2.0左右。
4.一般不含用电泳可以检测到的基因组DNA污染。
5.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
6. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。

试剂盒组成：

 

成分	5T
溶液A	50ml
溶液B	50ml
离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 先将1-2 g左右剪切好的动物组织放入50mL塑料离心管中，加10mL溶液A，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/mL 裂解液，否则十分容易产生DNA污染。
2. 加入0.2倍体积的自备*仿(10mL溶液A需2mL*仿)，振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 5000-7000rpm室温离心3～5分钟。
4. 将上清液(约6-7mL的无色透明水相，有时水相比重大时，水相在下层，有机相即蓝相在上层，吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的50mL塑料离心管中。注意：离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下少许上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。加入溶液B后，溶液为乳白色。
6. 将溶液转移到离心吸附柱中，5000-7000rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
7. 加10mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
8. 加10mL 通用洗柱液，室温离心1分钟，弃穿透液。此步可以省略。
9.室温5000-7000rpm离心2分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中，加入1mL RNA 洗脱液。
11.室温5000-7000rpm离心2分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
12. 重复10-11 步一次，大提离心吸附柱吸附能力较强，一般第二次洗脱能洗脱较第一次洗脱更多的RNA。
13. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
14. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH在7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260 RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
15. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA专用上样液(如RNA上样液)。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。

我公司的柱式动物RNA大量提取试剂盒现货供应，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
BTN131036 DNA 5’末端标记试剂盒 DNA 5’ End-Labeling Kit
6106-21-4 Succinic acid Sidium 琥珀酸*
PY01-154  脱氧核糖核酸酶I(1000u/mg)  0.1克  
ARB12833 小鼠天冬*酸*基转移酶(AST)ELISA检测服务 Mouse aspartate aminotransferase ,ast  ELISA KIT
HC0177 PE手套
肌*酸 3-Nitrobenzoic acid 107-97-1
ARB13213 小鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA代测服务 Mouse apoptosis inducing factor,aif ELISA KIT
ARB10940 人低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)检测服务 Human ldl-ic ELISA KIT
2,4-二羟基二*甲酮 Amberlite XAD761 131-56-6
草乙酸 DL-α-Glycerol phosphate magnesium salt hydrate 328-42-7
ARB13179 小鼠透明质酸(HA)含量检测 Mouse hyaluronic acid,ha ELISA KIT
(不需DNA酶消化)"
二**(代"胺")试剂(1%)   100ml
ARB11237 人玻连蛋白/体外粘连蛋白(VN/CD51+CD61)代做ELISA实验 Human vitronectin,vnr ELISA KIT
ARB12366 大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)elisa检测 Rat transforming growth factorsβ2,tgfβ2 ELISA KIT
N-乙酰-D-亮*酸 Chelex 100 sodiu*(代"m") form 19764-30-8
BTN131183 链激酶 Streptokinase
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·dGTP溶液(100mM)
编号：BTN120619
英文名称：dGTP Solution(100mM)
规格：0.5mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。

dGTP分子式为C10H13N5O13P3Na3,分子量是507.2，消光系数为13.7×103 M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为253nm。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·戊二醛磷酸缓冲固定液
编号：BTN131278
英文名称：Glutaraldehyde Fixative Solution
规格：250mL
本产品为2.5%戊二醛磷酸缓冲固定液，戊二醛为五碳醛，氧气、高温、中性和碱性pH均可使戊二醛失去醛基，产生聚合。戊二醛作为固定液的优点是对组织细胞的细微结构保存较好，不足之处是渗透慢。本产品固定时间通常为15分钟～4小时，不宜过长。

储存条件：常温运输、4℃保存，保存期半年。

·柱式分枝杆菌RNA提取试剂盒
编号：BTN130845
英文名称：Mycobacteria RNA Column extraction kit
规格：50次
本产品为2.5%戊二醛磷酸缓冲固定液，戊二醛为五碳醛，氧气、高温、中性和碱性pH均可使戊二醛失去醛基，产生聚合。戊二醛作为固定液的优点是对组织细胞的细微结构保存较好，不足之处是渗透慢。本产品固定时间通常为15分钟～4小时，不宜过长。

储存条件：常温运输、4℃保存，保存期半年。

·T4聚核苷酸激酶
编号：BTN120506
英文名称：T4 Polynucleotide Kinase
规格：250U
T4聚核苷酸激酶能够催化ATP的γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。本产品还具有3´磷酸酶活性，将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。其反应示意图如下：


产品用途：
1．DNA或RNA的末端标记，用作寡核苷酸探针和进行DNA测序。
2．寡核苷酸5´末端的磷酸化，以便进行连接反应。
3．除去3´磷酸基团。

产品组成：

成分	规格
T4聚核苷酸激酶，10U/μL	25μl
10×反应缓冲液	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1 单位指在37℃条件下，30分钟内催化 1nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量。

1×反应缓冲液：[70mM Tris-HCl(pH7.6@25℃)，10mM MgCl2，5mM DTT]，37℃温育。

热失活：65℃加热20分钟。

来源：重组E.coli菌株，克隆有T4多聚核苷酸激酶或修饰的T4多聚核苷酸激酶基因。

自备试剂：0.5M EDTA(pH8.0)、[γ-³²P或γ-³³P]-ATP或0.1mM ATP、DNA纯化试剂盒。

使用方法：

一、DNA 5´末端标记：
1．参考如下表格设置反应体系：

待磷酸化DNA	1～50 pmol(5´末端)
10×反应缓冲液	5μL
自备的[γ-³²P或γ-³³P]-ATP(3000Ci/mmol)	50pmol
补充无核酸酶的去离子水	至48μL
T4聚核苷酸激酶,10U/μL	2μL

2．按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
3．37℃孵育30分钟。
4．加入自备的1μL 0.5M EDTA(pH8.0)混匀，以终止反应。
5．后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒可以向我公司订购。

二、DNA 5´末端磷酸化：
1．参考如下表格设置反应体系：

待磷酸化DNA	1～50 pmol(5´末端)
10×反应缓冲液	5μL
自备的0.1mM ATP	3μL
补充无核酸酶的去离子水	至48μL
T4聚核苷酸激酶，10U/μL	2μL

2．按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
3．37℃孵育30分钟。
4．加入自备的1μl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀，以终止反应。
5．后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。


柱式动物RNA大量提取试剂盒现货供应关键词：BTN80901,柱式动物RNA大量提取试剂盒,Animal RNA Column large-scale extraction kit

PY08-037  乳糖发酵管(带导管) 3ml  10支/盒，用于大肠菌群的确证试验
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ECL化学发光法检测试剂盒"
ARB11773 人解脲脲原体抗体(UU-Ab)含量测试 Human ureaplasma urealyticum antibody,uu-ab ELISA KIT
F030309 胶体金标记羊抗乙肝e抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBeAg*GOLD
BTN90205 RNase A干粉 RNase A Powder
PY03-317  3%*化*甘露醇试验培养基  250克  
酚红 BCP,Na 143-74-8
PUC19质粒 Vanillin
ARB13985 猪基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)elisa检测 Porcine tissue inhibitors of metalloproteinase 1,timp-1 ELISA KIT
对甲*甲*(代"酸") TRIS-HC1 99-94-5
ARB11439 人真胰岛素(TI)检测服务 Human true insulin,ti ELISA KIT
PY02-016  霉菌培养基  250克  
ARB11399 人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)酶标法分析 Human neural cell adhesion molecule ligand 1,ncam-l1 ELISA KIT
A2801-12 新生牛血清 100ml|500ml
HC0245 Eppendorf 单道可调移液器(整支可消毒系列)

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