北京DNA marker(pBR322/MspI)厂家

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名称：北京DNA marker(pBR322/MspI)厂家
品牌：百奥莱博
英文名：DNA ladder(pBR322/MspI)
编号：BTN90602B
 本系列产品为传统的酶切分子量标准，由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后，加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知，每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。
 每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5uL。

使用效果：


疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。

北京DNA marker(pBR322/MspI)厂家正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·75%乙醇(RNase-Free)
编号：BTN60401
规格：250mL

·软骨RNA提取试剂盒
编号：BTN70401
英文名称：Cartilage RNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒专门从各种软骨组织样品中快速提取总RNA的试剂盒，它能有效克服传统TRIzol方法提取软骨组织RNA时，十分容易产生糖蛋白和酸性多糖污染这一缺点。

试剂盒特点：
1. 能有效去除糖蛋白、粘蛋白污染，OD260/280一般均在1.9以上。
2. RNA产率一般为5-15μg/100mg。
3. 操作简单，整个提取过程一般只需要10多分钟。
4. 得到的RNA可以直接用于RT-PCR、Northern杂交、mRNA纯化、Primer Extension、RNA Protection、in vitro translation等研究。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	25ml
溶液D	25ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 先将50-200mg新鲜或冷冻的软骨组织液氮研磨成粉，加入1mL溶液A(使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解)溶解，然后将研磨物转移到新的1.5mL离心管中，振荡混合30秒。也可以将软骨组织剪碎后与溶液A一起匀浆，再转移到离心管中。
2.在装有研磨物/匀浆物的离心管中加入0.3mL的溶液B，振荡器振荡30秒混匀。注意：振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
3. 加入0.2mL自备*仿，振荡器振荡30秒混匀。注意：振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温12000～15000g离心2-5分钟。
5. 将上清液(约0.8mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。最好留下100μl上清液不取。
6.在上清液中加入0.5mL的溶液C，振荡器振荡30秒混匀。注意：振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
7. 加入0.2mL的自备*仿，振荡器振荡30秒混匀。注意：振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
8.室温12000～15000g离心3分钟，两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
9. 将上清液(约1mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物。
10.在上清液中加入0.5倍体积的溶液D，振荡器振荡30秒混匀，此时溶液呈白色浑浊状。注意：振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
11.室温12000～15000g离心5-10分钟，RNA将在管底形成白色沉淀(约黄豆大小)。如果组织样品量少或需要提高RNA回收率，也可以延长离心时间到20-30分钟。
12.在离心管中加入1mL 75%的乙醇，振荡器上振荡混匀30秒。
13.室温12000～15000g离心5分钟，RNA将在管底形成细小沉淀(约芝麻大小)。
14. 重复上步75%的乙醇洗涤一次，RNA将在管底形成细小沉淀。
15.小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
16. 再短暂快速离心，用移液枪小心吸弃残留液。注意：不要吸弃沉淀。此步将有效去除残留的乙醇，否则后续反应会受到影响。
17. 加入适量(一般为20-50μl)RNase-free水使RNA沉淀溶解，存放于-80℃或立即使用。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥，否则RNA将变得十分难溶。
18. 检测

a)RNA完整性的电泳检测
如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。如果是简单检测，可以使用TAE或百奥莱博的SuperBuffer-2 DNA/RNA两用快速电泳液，但文献报道必须使用变性上样液(BioTechniques，9：558，1990)。普通DNA上样液不含变性剂，也没经过去RNase处理，所以最好不要使用。
尤其需要注意的是不要使用TBE进行RNA电泳，因为TBE所含硼*(代"酸")是研究多糖的经典方法----硼*(代"酸")络合法中的关键成分，硼*(代"酸")通过与RNA核糖中的羟基发生络合反应，形成RNA分子内或RNA分子间的络合复合物，使同样长度的RNA具有不同的泳动速度，电泳条带弥散，同时有大的RNA络合复合物迟留在加样孔中(一般会误以为是基因组DNA污染)。RNA分子内或RNA分子间的络合物的形成的多少和比例又与硼*(代"酸")与RNA的数量比例有关，而RNA样品中污染的其他多糖也会参与此反应，使硼*(代"酸")对RNA电泳的影响更复杂，所以TBE对RNA电泳的影响没有规律性和重复性。有的样品可以使用有的又不行，最好是避免使用。
由于动物细胞中70-80%的RNA为rRNA，后者又由28S(约4800nt)，18S(约1900nt)和5.8S(约120nt)三种组成，所以变性胶电泳后应该在UV下看见三条清晰的rRNA带。由于核酸长度与结合EB的数量成正比(当然还与RNA的二级结构有关，双链部分结合能力比单链部分强)，所以28S rRNA条带的荧光强度一般比18S rRNA条带的荧光强度强1.5-2.3倍。如果这两条rRNA带不清晰或比例小于此范围则表示RNA有降解(因为大的RNA被酶降解的可能更大)。

b)RNA产量产率测定
将5-10μl RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
注意不要将RNA稀释在DEPC水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%。

c)RNA纯度测定
无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，OD260/OD230一般在2.0-2.3之间，如果低于或高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质或多糖的污染，但一般不影响RT-PCR等反应。蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除，DNA和多糖污染可以分别用百奥莱博的DNA Scavenger和PS Scavenger去除。



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PY02-063  抗生素检定培养基Ⅱ号(PH7.8-8.0)  250克  
ARB12757 小鼠D-乳酸脱*酶(D-LDH)ELISA检测服务 Mouse d-lactate dehydrogenase,d-ldh ELISA KIT
ARB10974 人免疫球蛋白G1(IgG1)代做ELISA实验 Human lmmunoglobulin g1,igg1ELISA KIT
ARB11518 人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)免费代测 Human thymic stromal lymphopoietin,tslp ELISA KIT
J0308                  兔抗大鼠IgG(H+L)抗血清                          
ARB12088 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)酶免分析 Rat aquaporin 4,aqp-4 ELISA KIT
PY02-183  麦芽汁琼脂  250克  
BTN120308 植物叶绿体纯化试剂盒 Plant Chloroplast Purification Kit
ARB10057 人B因子(BF)尿液中含量检测 Human factor b,bf ELISA KIT
ARB14207 人甲肝病毒抗体IgG(HAV-IgG)含量测试 
ARB10654 人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA代测服务 Human angiopoietin-like protein 3,angptl3 ELISA KIT
ARB13448 鸡白介素5(IL-5)检测服务 
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BTN131179 核酸稀释液,测OD专用 Diluent for NA OD Detection 核酸稀释液,测OD
75621-03-3 CHAPS
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DL-异亮*酸 Fenofibrate 443-79-8
DN2601 DNAzol 基因组DNA快速提取试剂
PY02-331  FraserⅡ增菌液基础  250克  
ARB11463 人胰岛素(INS)ELISA代测服务 Human insulin,ins ELISA KIT
9068-59-1 中性蛋白酶
001011 鸡血清
320-67-2 5-氮杂胞苷 5-Azacytidine
145224-94-8 MES   2-(N-吗*(代"啡")啉)乙磺酸
D-缬*酰-L-白*酰-L-赖*酸对硝基*(代"*")胺2盐*(代"酸")盐 Magnesium gluconate 62354-43-2
BTN120201 超敏化学发光(HRP)检测试剂盒 Ultrasensitive ECL Kit
BL0829 HRP标记兔抗生物素抗体
ARB13437 鸡甲状旁腺激素(PTH)酶联免疫定量检测 Chicken paRathyroid hormone,pth ELISA KIT
F030234 HRP标记山羊抗人IgG抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Human IgG
STM溶液(pH7.4)  0.25M|2M 100ml
ARB12295 大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)免费代测 Rat anti-smooth muscle antibody,asma ELISA KIT
HC0140 插口不锈钢酒精灯(防泄漏防爆)
柠檬酸铜 3,4-Dihydroxybenzaldehyde 10402-15-0
F030505 FITC标记兔抗牛血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-BSA*FITC

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