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北京百奥莱博科技有限公司
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百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN60405型1M DTT溶液(RNase-Free)说明书,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BTN60405型1M DTT溶液(RNase-Free)说明书
品牌:百奥莱博
编号:BTN60405
规格:10mL
产地:国产|进口
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BTN60405型1M DTT溶液(RNase-Free)说明书关键词:百奥莱博,1M DTT溶液(RNase-Free),BTN60405
·一管式双链cDNA合成试剂盒
编号:BTN130308
英文名称:One-Tube double-stranded cDNA Synthesis Kit
规格:10次
本产品是用于一管式双链cDNA合成的试剂盒。cDNA第一链合成的原理是以OligodT为通用引物的、MMLV催化的逆转录反应。其原理如下:
cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口,再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链,其原理图如下:
产品特点:
1. 即开即用,含有合成两条cDNA链的所有试剂。
2.适用于含poly rA的RNA,对不含poly rA的RNA(如细菌RNA),不能使用本试剂盒制备ds cDNA。
3.一管式进行,第一链cDNA合成后不需要任何处理,直接进入第二链的合成。
4. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
5. 本试剂盒足够10次80μL体系的双链cDNA合成反应。
6. 如果需要合成全长cDNA,最好选用SMART全长cDNA双链合成试剂盒。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
Oligo dT引物 | 10μl |
cDNA第一链合成缓冲液 | 40μl |
MMLV 逆转录酶(200U/μL) | 10μl |
5×cDNA 第二链合成缓冲液 | 160μl |
20×cDNA 第二链合成酶混合液 | 40μl |
T4 DNA聚合酶 | 20μl |
0.2 M EDTA溶液 | 40μl |
超纯水 | 1ml |
说明书 | 1份 |
成分 | 用量 |
自备mRNA样品 | 4μl(0.5-2μg) |
Oligo dT引物 | 1μL |
70℃ 2分钟后室温放置2分钟,短暂离心 | |
cDNA 第一链合成缓冲液 | 4μL |
MMLV 逆转录酶 | 1μL |
轻柔吹打混匀后42℃保温90分钟合成第一链cDNA | |
超纯水 | 48μL |
cDNA 第二链合成缓冲液 | 16μL |
cDNA 第二链合成酶混合液 | 4μL |
轻柔吹打混匀后,短暂离心,16℃保温2小时 | |
自备的T4 DNA聚合酶 | 2μL |
轻柔吹打混匀后,16℃继续保温30分钟 | |
0.2M EDTA溶液 | 4μL |
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