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- 详细信息
- 技术资料
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619
- 英文名:
Fungus DNA Column extraction kit(Glass bead method)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法)价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法)价格
规格:50次
产地:国产|进口
编号:BTN100303
品牌:百奥莱博
英文名:Fungus DNA Column extraction kit(Glass bead method)
真菌DNA提取是一个难题,一是因为真菌有菌丝体、孢子等多种完全不同的结构形态,二是因为其细胞壁一般都很厚,比较难以破碎。本产品是液氮研磨法柱式真菌DNA提取试剂盒的姊妹产品,它利用玻璃珠法破碎细胞,主要用于从真菌孢子和液体培养的真菌细胞中提取DNA(液氮研磨法柱式真菌DNA提取试剂盒采用液氮研磨法破碎细胞,适用于从真菌菌丝体中提取其基因组DNA)。
产品特点:
1. 即开即用,提供包括玻璃珠、离心吸附柱在内的所有试剂和耗材。
2. 采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好,也不容易带入外援真菌DNA。
3. 本方法提取一个样品只需要10余分钟,方便、快速和高效。
4.一次可以处理5mL的过夜真菌培养物,所得的基因组DNA OD260/OD280一般都在1.8左右,长度一般在20 kb左右,每mL菌液的DNA产率一般在1-3ug。可以直接用于PCR和酶切等后续试验。
试剂盒组成:
| 成成分 | 规格 |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 25ml |
| 溶液C | 75ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 酸洗玻璃珠,400μm | 25g |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,保存期为一年。
使用方法:
1. 对菌液:取3-5mL过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中,12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
2. 对菌落:用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落(约50mg),转移到装有1mL水的干净的塑料离心管中,洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
3. 对孢子材料,一般取0.1g左右,直接加入到离心管中,然后进入下一步操作。
4.在材料中加入无菌水1mL,振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
5.沉淀中加入500μl溶液A和0.5克的玻璃珠,涡旋震荡10分钟。
6. 加入500μL的溶液B,涡旋震荡3分钟,12000rpm离心2分钟,将上清液全部转移到一个5mL的干净的塑料离心管中。或者每管0.3mL,分别转移到2-3个1.5mL的干净的塑料离心管中。
7.在上清中加入3倍体积的溶液C,颠倒数次混匀后,分三次上离心吸附柱,每次上柱后均先室温放置2分钟,然后12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液,再第二次上柱,重复上面的操作,直到挂柱步骤完成。
8.在离心吸附柱中加入500μl通用洗柱液,12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液。
9. 重复上步操作一次。
10. 12000rpm空柱离心1分钟。
11. 加入50-100μl DNA洗脱液2.0,室温放置1分钟以上,12000rpm离心1分钟,穿透液即为真菌DNA样品。
12. 为了得到更多的DNA样品,可以重复上步操作1-2次。
13. 所得DNA即可立即使用或放冰箱长期保存。
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柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法)价格关键词:BTN100303,Fungus DNA Column extraction kit(Glass bead method,柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法)
·HEPES溶液(1M,pH7.3)(DNA级)
编号:BTN140654
规格:250mL
·Tth RecA蛋白
编号:BTN130662
英文名称:Tth RecA Protein
规格:100μg
Tth RecA蛋白是一种分离自嗜热栖热菌的RecA同源蛋白。在最适温度65-75℃范围内,Tth RecA蛋白具有依赖于ssDNA的ATPase活性。由于具有极高的热稳定性,对于需要高温反应条件的分子生物学技术,如核酸扩增和测序来说,Tth RecA蛋白是一个理想的选择。
产品特点:
1.电镜分析DNA结构
2.D环突变
3.用RecA蛋白包被的探针来进行文库筛选
4.DNA靶位点的裂解
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
·一管式双链cDNA合成试剂盒
编号:BTN130308
英文名称:One-Tube double-stranded cDNA Synthesis Kit
规格:10次
本产品是用于一管式双链cDNA合成的试剂盒。cDNA第一链合成的原理是以OligodT为通用引物的、MMLV催化的逆转录反应。其原理如下:
cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口,再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链,其原理图如下:
产品特点:
1. 即开即用,含有合成两条cDNA链的所有试剂。
2.适用于含poly rA的RNA,对不含poly rA的RNA(如细菌RNA),不能使用本试剂盒制备ds cDNA。
3.一管式进行,第一链cDNA合成后不需要任何处理,直接进入第二链的合成。
4. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
5. 本试剂盒足够10次80μL体系的双链cDNA合成反应。
6. 如果需要合成全长cDNA,最好选用SMART全长cDNA双链合成试剂盒。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| Oligo dT引物 | 10μl |
| cDNA第一链合成缓冲液 | 40μl |
| MMLV 逆转录酶(200U/μL) | 10μl |
| 5×cDNA 第二链合成缓冲液 | 160μl |
| 20×cDNA 第二链合成酶混合液 | 40μl |
| T4 DNA聚合酶 | 20μl |
| 0.2 M EDTA溶液 | 40μl |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:mRNA的制备
本试剂盒不提供mRNA提取试剂,用户需自备相关试剂。
二:双链cDNA的合成
1.在一个干净的塑料离心管中,按下表设置cDNA合成反应:
| 成分 | 用量 |
| 自备mRNA样品 | 4μl(0.5-2μg) |
| Oligo dT引物 | 1μL |
| 70℃ 2分钟后室温放置2分钟,短暂离心 | |
| cDNA 第一链合成缓冲液 | 4μL |
| MMLV 逆转录酶 | 1μL |
| 轻柔吹打混匀后42℃保温90分钟合成第一链cDNA | |
| 超纯水 | 48μL |
| cDNA 第二链合成缓冲液 | 16μL |
| cDNA 第二链合成酶混合液 | 4μL |
| 轻柔吹打混匀后,短暂离心,16℃保温2小时 | |
| 自备的T4 DNA聚合酶 | 2μL |
| 轻柔吹打混匀后,16℃继续保温30分钟 | |
| 0.2M EDTA溶液 | 4μL |
注:如果不需要将双链cDNA平末端化,则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μL检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片,则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常,需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA 文库构建、抑制性差减杂交等实验。
柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法)价格关键词:BTN100303,Fungus DNA Column extraction kit(Glass bead method,柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法)
·30mL亲和层析柱
编号:BTN140652
英文名称:Affinity Chromatography Colum(30mL)
规格:30mL
本产品适用范围广泛,可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子;还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。
亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原-抗体、酶-底物或抑制剂、激素-受体等),通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。
亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法,其示意图如下:
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
常用亲和标签及纯化方案:
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