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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Normal Goat Serum
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 保存条件：
2-8℃保存
- 规格：
10ml/100ml/500ml
封闭山羊血清（原液）
别名 : blocking serum英文名称 : Normal Goat Serum
储存条件 : -20℃
单位 : 瓶
封闭血清适用于免疫组化或者免疫荧光实验中样本的封闭。可以封闭待检样本中与蛋白质非特异性结合的位点，另外还可以封闭样品中内源性的Fc片段结合位点，阻断抗体与样品中的Fc受体结合，从而降低背景，减少假阳性。在选择封闭血清时，要注意封闭用血清中不能含有目标蛋白，且与一抗来源不同，可用与二抗相同来源的封闭血清。
使用方法：
使用时，用PBS（0.01mol/LpH7.2-7.4）将封闭血清原液稀释10或20倍，配成10%或者5%的工作液，直接滴加在组织切片或者细胞凃片上，37℃孵育10-30分钟，清除血清，勿洗，滴加适当比例稀释的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃过夜。
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文献和实验一、SP 法 1）脱蜡、水化；2）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；3）3% H2O2（80% 甲醇）滴加在 TMA 上，室温静置 10 分钟；4）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；5）抗原修复；6）PBS 洗 2～3 次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗 50μl，室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9）4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10）PBS 洗 3 次各 5 分钟；11）滴加 Ⅱ 抗 40～50 μl，室温
不完全：使用正常山羊血清或 1%～5% BSA 封闭 1h。 （5）离子相互作用造成的背景：降低抗体稀释液的离子强度。 （6）切片或细胞过于干燥或孵育温度过高：实验过程中请保持切片处于湿润状态，一抗孵育时尽量使用 4℃ 过夜孵育。 （7）内源性过氧化物酶残余：适度延长内源性过氧化物酶阻断剂阻断时间。 （8）样本于缓冲液或抗原修复液中浸泡太久：样本在溶液中浸泡时间不要超过 24h。 Q4：为什么会出现非特异性染色，如何避免？ （1）抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加非特异性染色：由于本试剂盒使用
ChamQTM/AceQ® QPCR Master Mix 5 ml 可供 20 μl 体系 500 次反应。 模板的上样量 若直接使用 cDNA 原液作为模板，建议使用体积不超过 qPCR 反应总体积的 1 / 10！ 当复孔之间重复性不佳时，可将模板做适当稀释后以大体积加入反应体系，可有效提高实验重复性。看小 V 做的实验，是不是重复性爆表啊～～～ 预变性时间 常见的 qPCR 试剂预变性时间从 30 sec - 15 min 不等。科学家们为了封闭常温下酶的活性，使 qPCR 产生
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