北京通用型PCR试剂盒(含模版和引物)厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京通用型PCR试剂盒(含模版和引物)厂家的品牌：百奥莱博，是优质的核酸扩增(PCR)产品，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多通用型PCR试剂盒(含模版和引物)等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。

名称：北京通用型PCR试剂盒(含模版和引物)厂家
规格：20次
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本试剂盒包含完成PCR反应所需全部试剂，可进行PCR实验的教学和科研。其中模板为质粒DNA；引物为根据质粒DNA序列设计的上、下游引物；2×Taq PCR MasterMix包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可最大限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。使用本试剂盒进行PCR反应后，PCR产物大小应为2000bp。

试剂盒组成：

 

组成	浓度	体积
模板	10 ng/μl	30μl
上游引物(2000 FW)	10μM	30μl
下游引物(2000 RV)	10μM	30μl
2×Taq PCR MasterMix(含染料)	-	2×500μl
去离子水	-	1 ml

操作步骤：
1、冰浴中彻底融化模板，引物和2×Taq PCR MasterMix，混匀后快甩离心将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

	50μl反应体系
上游引物(2000FW) 10μM	1μl
下游引物(2000RV) 10μM	1μl
模板	1μl
2×Taq PCR MasterMix	25μl
水	22μl

3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	5 min	1
变性	94℃	30 sec	30
退火	54℃	30 sec
延伸	72℃	2 min
最后延伸	72℃	5 min	1

6、反应完成后，取5ml反应液，1％琼脂糖凝胶电泳，观察条带情况。

储存条件：-20℃，有效期一年。

北京通用型PCR试剂盒(含模版和引物)厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·超低分子量蛋白Marker III(3.4～100kd)
编号：RFT046
英文名称：μltra Low Molecμlar Weight Protein Marker III
规格：10T(50μl)
本产品包含5种多肽和3种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.4kD-100kD。可以用来判断 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。



使用说明：
第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用；本产品为即用型，融化后既能使用，不能95℃加热处理。

一. 制胶：
I 配制分离胶
1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2．加入10%APS和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
4．静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
表一 (一块0.75mm mini胶用量)

	分离胶	浓缩胶
	18％T, 5%C /6.0ml	5％T, 3.3%C/2 ml
40% PAA(19:1)	2.7 ml	/
40% PAA (29:1)	/	0.25 ml
4×凝胶缓冲液	1.5 ml	0.5 ml
乙二醇(电泳级)	1.8ml	/
ddH2O	/	1.25 ml
10％APS	50-65μl	20μl
TEMED	6μl	2μl

注：如非必须，不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶，尽量使用厚度0.75mm的凝胶，这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。
1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2．加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
4．静置30-60分钟装待凝胶聚合

二. 电泳：
1. 取一管分装好的Marker样品，彻底融化，不要加热处理，充分混匀后备用。
2. 电泳前，将10×Tris-Tricine-SDS电泳缓冲液用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的内外槽加入1×缓冲液，轻柔拔出梳子，将Marker或蛋白样品(样品已经过2×Tricine上样缓冲液处理)加入点样孔，根据表二条件进行电泳，至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2-3个小时。
注：如果电泳时间过短，染色时，指示前沿容易遮挡小于5kd的小肽。
表二 多肽电泳条件

恒电压	150 V
起始电流	45-55 mA
结束电流	10-15 mA
电泳时间	2-3小时

三. 染色
根据常规实验步骤进行染色和观察。

储存条件：-20℃,有效期12个月。


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·15kb plus DNA ladder(250～15000bp)
编号：RFT012
规格：100T(2×250μl)
本产品是由10条带状双链DNA条带组成的DNA Ladder，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。10条带大小包括250，500，1000，1500，2500，4000，5000，7500，10000，15000bp。其中2500bp条带为100ng/5μl，其余条带浓度50ng/5μl。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注：根据梳子的厚度和宽度进行上样。
每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl；
窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl；
宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl；
如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子，可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为0.8-1.0％，凝胶长度10cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间35-40分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。


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