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- 百奥莱博
- JN0065-ZMO
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
719
- 英文名：
Cas9 Protein
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖Cas9蛋白(Cas9核酸酶)厂家价格在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称：Cas9蛋白(Cas9核酸酶)厂家价格
编号：JN0065
规格：50U
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9 系统通过将入侵噬菌体和质粒 DNA 的片段整合到 CRISPR 序列中，并利用相应的 CRISPR RNAs（crRNAs）来指导Cas9蛋白对同源序列的降解，从而提供免疫性。人工改造过的Cas9/sgRNA系统通过sgRNA（short guide RNA）引导Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA，可用于基因敲除和精确编辑DNA等操作。
产品特点：纯蛋白体系，避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰。
产品用途：
1、基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除；
2、基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入；
3、sgRNA剪切靶点DNA的效率检测，降低体内筛选成本；
4、体外剪切靶DNA的特异位点。
应用实例：
图例一）Cas9核酸内切酶 DNA片段切割活性检测。
带有靶位点的DNA片段：6100bp；酶切后的片段：3900bp和2200bp。
活性定义：37℃，在sgRNA足量的20μL反应体系中，1h完全切割1μg质粒或线性化DNA所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留；无核酸内、外切酶污染；无RNase污染。
体外切割体系（20μl）：
| 组分 | 体积 |
| dsDNA | 200nM |
| sgRNA | 100nM |
| Cas9 酶 | 1U |
| 10×Reaction Buffer | 2μL |
| RNase Free Water | To 20μL |
| 37℃反应1h，琼脂糖胶电泳检测 | |
*可在反应体系中添加20U的RNase Inhibitor，防止dsDNA不纯导致sgRNA的降解。
储存条件：-20℃
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·Phi29 DNA聚合酶
编号：JN0020
英文名称：Phi29 DNA Polymerase
规格：125U
本酶是从Bacillus subtilis噬菌体Phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶，利用基因重组技术，在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。Phi29 DNA聚合酶具有高效的DNA合成能力，可连续合成多达70kb的DNA片段。同时该酶具有3´→5´外切酶校读功能，保真性高，还具有特殊的链置换和连续合成特性。
产品组成：
| 组份 | JN0020-125U |
| phi29 DNA 聚合酶 | 125U |
| dNTP混合液（各10mM） | 200μl |
| 10×phi29 Buffer | 1ml |
产品特点：
1、极高的掺入率。
2、超强的链置换能力。
3、保真性高。
4、中温下反应。
产品用途：
1、恒温protein-primed DNA扩增。
2、利用随机引物扩增DNA。
3、滚环复制。
4、复制extended-region。
注意事项：
1、该酶缓冲液中含有还原剂DTT以便保证其最大酶活性。故如果缓冲液不新鲜或经过反复冻融，使用前应添加4mM的DTT。
2、要求高扩增效率的反应，请选择百奥莱博蛋白质工程改造的升级版super phi29 DNA 聚合酶（JN0019）。
应用：菌液测序模板制备
优点：无需细菌培养、收集、裂解和质粒DNA的分离与纯化，不需要离心机和PCR仪。
样品预变性：挑取单克隆，参考右侧反应体系热变性。
质粒扩增：按下面反应条件进行，如选用百奥莱博super phi29 DNA 聚合酶（JN0019）反应时间可缩短到1小时*
热失活：65℃，10分钟。
测序反应：取上述反应液2μl加8μl双蒸水，即可用于直接测序。
常用反应体系（50μl）
| 10×phi29 Buffer | 5μl |
| 随机引物（1mM） | 1.25μl |
| 质粒模板（1μg/ml) | 1μl |
| 加ddH2O至45μl,95℃预变性3min,冰上冷却。 | |
| dNTP(各10mM) | 2.5μl |
| 100x BSA | 0.5μl |
| phi29 DNA Pol | 2.5μl |
| 30℃ | 过夜 |
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
活性定义：在30℃条件下，10min内能使0.5 pmol的dNTP掺入酸不溶性物所需要的酶量定义为1个活性单位。
10×反应缓冲液：500mM Tris-HCl（pH 7.5）, 100mM MgCl2，100mM (NH4)2SO4，40mM DTT。反应时需要加入dNTP。
储存条件：-20℃
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·重组人Cyclophilin A(CYPA)
编号：JN1606
英文名称：Recombinant Human Peptidyl-prolyl Cis-trans Isomerase A
规格：10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的大肠杆菌表达系统制备而成，目的基因编码的Met1-Glu165表达纯化得来。
Cyclophilin A/CYPA质量控制：＞95%(还原性SDS-PAGE)
Cyclophilin A/CYPA制剂：液体
Cyclophilin A/CYPA保存：收到货后请置于-20℃，可保存6个月，避免反复冻融。
关于Cyclophilin A/CYPA：
Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase A is a member of the peptidyl-prolyl cis-trans isomerase (PPIase) family, which catalyzes the cis-trans isomerization of proline imidic peptide bonds. Cyclophilin A regulate many biological processes, including intracellular signaling, transcription, inflammation, and apoptosis. Cyclophilin is also incorporated into many viruses, including HIV1, where it has been speculated to be involved in functions such as viral assembly and infectivity. The immunosuppressive activity of cyclosporins has been correlated with their ability to form complexes with cyclophilins that inhibit calcineurin phosphatase activity and prevent incorporation of cyclophilin into viral particles. The cyclosporin/cyclophilin complex selectively binds and inactivates calcineurin, making it a useful inhibitor for studying calcineurin activity.
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文献和实验CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理
选育新方法。而 CRISPR-Cas9 技术的出现，更是极大推动了微生物基因组编辑准确性和效率的提高。【背景】泓迅科技利用 CRISPR-Cas9 技术编辑酵母菌中的一个 920bp 的 ADE1 基因。ADE1 是腺嘌呤合成相关基因，如果 ADE1 失活，则细胞将会积累红色色素，呈现红色菌落。【方法】1、质粒构建2、sgRNA 活性检测3、挑选活性较高的 sgRNA 进行基因组定点编辑4、利用基因功能变化、表性变化和测序等方法检测基因定点修饰结果。【结论】1、从颜色表型变化得知，酵母菌落变成红色菌落，可知 ADE
方法（有视频），个人认为，自行查资料理解每一个元件的含义和作用，可以帮助更快的补充背景知识。通过将散落的知识点集合起来，最后拼凑成自己的知识地图。那么，为什么看起来好像这些 mRNA 都一样，怎么不只放一条完事了？不是滴。。。还有不一样的 mRNA。在学生信的时候，听到过一个词，「可变剪接」，有了初步印象之后，在这里才算是实实在在看到了，我认真的数了数，mRNA 画了 15 条，TP53 蛋白也画了 15 条。那么我们可以理解为，TP53 有 15 个亚型，当然，每个亚型都有自己的 mRNA。Step
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