北京Interleukin 16 mRNA原位杂交试剂盒厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京Interleukin 16 mRNA原位杂交试剂盒厂家价格在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京Interleukin 16 mRNA原位杂交试剂盒厂家价格
产地：国产|进口
规格：100T
品牌：百奥莱博
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.Interleukin 16 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
Interleukin的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。

欲了解更多北京Interleukin 16 mRNA原位杂交试剂盒厂家价格的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:

·浓缩型免疫组化试剂盒 SABC-CY3(POD)(小鼠IgG)
编号：ZN1853
规格：1盒
产品规格：1KIT
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
工作原理
SABC 是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。CY3 比传统上的荧光更具有亲水性，因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合，从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。CY3 在 554nm 激化，在 568-574nm 发射荧光，呈鲜红色。免疫组化双显色试剂盒采用 CY3+过氧化物酶 POD 标记的链酶亲和素(SABC-CY3+POD)，用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。
试剂盒内容：
1．正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10)1ml/2ml/5ml
2．生物素化山羊抗小鼠 IgG(参考效价 1：100)0.1ml/0.2ml/0.5ml
3．SABC-Cy3(参考效价 1：100)0.1ml/0.2ml/0.5ml
4．SABC-POD(参考效价 1：100)0.1ml/0.2ml/0.5ml
另有四个滴瓶供稀释试剂用。
石蜡片染色步骤：
1．石蜡切片，常规脱蜡至水。
2．3%H2O2 去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性.PBS冲洗,5分钟×3次。
3．根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4．封闭。滴加用稀释后的正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5．滴加一抗(小鼠 IgG)，37℃孵育1-2 小时或 4℃过夜。PBS 冲洗，5分钟×3次。
6．滴加生物素化山羊抗小鼠 IgG，37℃孵育30分钟。PBS 冲洗，5分钟×3次。
7．滴 加 SABC-Cy3(参 考 效 价 1:100)或SABC-POD(参考效价 1：100)，37℃孵育30分钟。PBS 冲洗，5分钟×3次。
8．显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选 DAB。自来水充分冲洗。
9．根据需要进行苏木素复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂或抗荧光衰减封片剂封片。
10．结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。
建议：
1．热修复可选用枸橼酸盐缓冲液、EDTA 抗原修复液、PBS 缓冲液、TBS 缓冲液等作为抗原修复液。
2．酶修复可选用复合修复液、抗原修复液Ⅰ、胰蛋白酶、胃蛋白酶消化组织。


北京Interleukin 16 mRNA原位杂交试剂盒厂家价格关键词：ZN0767,Interleukin 16 mRNA原位杂交试剂盒,百奥莱博

SJ0542 Sepharose CL-2B
BTN121104 增强型天狼猩红染色试剂盒 Enhanced Sirius Red Straining Kit
ARB11540 人高敏甲状腺素(u-T4)检测服务 Human ultrasensitivity thyroxine,u-t4 ELISA KIT
F030209 HRP标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*HRP
CYB161047 牛IgG(液体-pH7.2PBS)
BL1322 dATP(100mM)
9007-71-9 酪蛋白(不溶于中性水) Casein
PY08-074  0.85%生理盐水 9ml  20支/盒  用作稀释液或菌悬液的制备
改良*酚品红染色液   100ml
粘液酸 GMS 526-99-8
ARB14138 大鼠淀粉酶(AMS)代做ELISA实验 
非诺贝特 Fmoc-D-Met-OH 49562-28-9
ARB14228 人C1q_TNF相关蛋白9(CTRP9)ELISA代测服务 
北京Interleukin 16 mRNA原位杂交试剂盒厂家价格关键词：ZN0767,Interleukin 16 mRNA原位杂交试剂盒,百奥莱博

皂化液   100ml
ARB12573 大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA代测服务 Rat high mobility group protein b1,hmgb-1 ELISA KIT
ARB10502 人白细胞介素11(IL-11)含量测试 Human interleukin 11,IL-11ELISA KIT
草酸高铁铵 Ammonium bicarbonate 13268-42-3
过硫*(代"酸")铵溶液(AP,10%)   5×1ml|10ml
BTN131058 咪唑 Imidazole
ARB10204 人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)酶免分析 Human β2-glycoprotein 1 antibody iga/g/m,β2-gp1 iga/g/m ELISA KIT
BL0927 RBITC标记羊抗猪IgG抗体
阿糖尿苷 DL-Arginine 3083-77-0
细胞线粒体分离试剂盒   50T
BL0943 生物素化羊抗大鼠IgG抗体
ARB10910 人抗凝血素抗体(APT1/APT2)elisa检测 Human anti-prothrombins antibodies,apt1/apt2 ELISA KIT
ARB13227 小鼠脱氧吡*(代"啶")酚/脱氧吡*(代"啶")啉(DPD)酶免分析 Mouse deoxypyridinoline,dpd ELISA KIT
ARB13011 小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA检测服务 Mouse prolifeRating cell nuclear antigen antibody,pcna ELISA KIT
F020108 山羊抗乙肝表面抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBsAg
ARB12058 大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)酶免分析 Rat epithelial neutrophil activating Peptide 78,ena-78 ELISA KIT
BL0884 兔抗猴IgG免疫血清
三癸酸丙三醇酯 Lysine Sepharose 4B 621-71-6

我公司生产供应销*(代"售")的基因结构和功能正全品类优惠促销，十分期待您的咨询选购北京Interleukin 16 mRNA原位杂交试剂盒厂家价格。