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文献和实验时效率最高 [2,3] 。在设计钙变色子时,用 GFP 突变体作为两个伙伴荧光团:蓝绿色荧光蛋白作为给体,而黄色荧光蛋白作为受体(见图4.1 ; 参考文献 [4])。如果两个荧光团融合于不同的作用伙伴,分子间 FRET 可以用来探测蛋白质-蛋白质相互作用,而如果两个荧光团都融合到同一个蛋白质,分子内 FRET 可用来探测蛋白质剪切和构象变化 [3] 。 4.1.2 钙变色子的一般设计 使用分子内 FRET 的概念,钙变色子由夹在 CFP 和 YFP 之间的,前后融合的 CaM 的 N
。 Summary: 水稻,作为植物领域的模式生物,其研究意义十分重大。水稻花序发育决定产量,并依赖于腋生分生组织(AMs)的活性,然而,已有文献对水稻花序早期发展的高分辨率分析却十分缺乏。因此,在本研究中,使用高通量单细胞 RNA 测序分析了 37571 个水稻花序细胞,并构建了涵盖早期生殖发育过程中花序到小花的过渡的基因组尺度基因表达资源。重建小花和 AM 的分化轨迹,鉴定高度异质的幼花序中的离散细胞类型和调节因子群,然后通过原位杂交和荧光标记系进行验证。通过分析早稻花序发育的综合转录组图谱,在遗传证据
三篇顶刊论文,同一个技术选择——BiFC如何破解植物蛋白互作难题?
相互作用,它们会在空间上相互靠近 ●这种靠近使得原本分离的荧光蛋白两个片段重新组装成完整的、具有荧光活性的蛋白 ●通过荧光显微镜观察是否出现荧光信号,即可判断蛋白间是否存在相互作用 常见荧光蛋白选择: ➤Venus/YFP:最常用的BiFC荧光蛋白,荧光强且背景敏感度低 ➤CFP/ECFP:青色荧光蛋白,适用于多色BiFC或与YFP组合进行FRET分析 ➤mCherry/mRFP:红色荧光蛋白,穿透性强,适用于深层组织成像 实战案例:BIFC技术如何验证植物蛋白互作?
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