pCAMBIA35s-EGFP植物荧光蛋白报告

荧光标记怎么选择？

荧光蛋白和荧光素酶是在基因工程中广泛使用的两类报告基因 (reporter gene)，是研究生物分子或细胞活动规律及本质的重要工具。 荧光蛋白 荧光蛋白能被一定波长的光激发，电子被激发到高能级，随后向低能级跃迁的过程中发出比激发光波长更长的荧光。绿色荧光蛋白（GFP）最初是在水母中发现的，随后各种颜色的荧光蛋白被开发出来。目前荧光蛋白按照颜色分类主要分为绿色系、红色系、蓝色系、青色系、黄色系和橙色系（表 1）。这么多的荧光蛋白，可以根据哪些方面来选择呢？ 激发峰/发射峰：每种荧光蛋白

报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶？成像和定量根本不是一回事

选报告基因时，很多人随手挑个 EGFP 就转了，等要做定量才发现有光毒、有背景。结论先说：要肉眼/显微镜看定位和活细胞成像，选荧光蛋白（EGFP、mCherry）；要测基因表达强弱、做低背景定量，选荧光素酶。两者不是谁好谁坏，是干的活不一样。 先给一个直接答案 选报告基因时，很多人随手挑个 EGFP 就转了，等要做定量才发现有光毒、有背景。 报告基因是干嘛的 报告基因就是一段"自带可见信号"的标签基因，克隆到你关心的启动子或基因下游，靠它的信号强弱/位置反推目标基因表达得怎么样。科研里最常

文献速递｜低丰度基因和 IncRNAs 表达的动态示踪

表达的动态示踪。   该研究建立了一种通用的内源基因转录门控系统，为活细胞中实时标记低表达基因和 lncRNAs，研究其生物学功能提供了有效工具。   本次特邀论文共同第一作者 基正邦 硕士 撰文，介绍他们建立 SPH-OminiCMV 荧光报告系统的全过程，并解密该技术如何应用于低表达基因和 lncRNAs 的研究。    Part1  监测内源基因表达的技术概述 监测内源基因活性的常规方法是将荧光蛋白精确插入蛋白编码框中 [3]，但是，这种方法并不适用于非编码基因和低丰度转录的基因。