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- 2026年08月03日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
3个月
- 英文名：
MiaoLingBio
- 库存：
1000
- 供应商：
淼灵生物
- 规格：
1管
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文献和实验一、材料和试剂 1. Hairpin-pLKO.1vector（OpenBiosystems） 2. Packagingvectors:第二代包装质粒包含gag,pol,和rev基因（pCMV-dR8.91或pCMV-dR8.74psPAX2）和包被质粒（pMD2.G）（Addgene） 3. 脂质体2000（Invitrogen） 4.OptiMEM无血清培养基（Invitrogen） 5. 293T包装细胞（ATCC）
66xiaogai 求教：我要构建一个逆转录病毒载体，不知道在插入外源基因（shRNA）时需不需要考虑像一般的载体表达时考虑基因错配的问题，如果加入的外源基因上带有启动子，那逆转录病毒载体上的启动子要切掉么？谢谢。 破茧的蝶 楼主问题解决了吗？现在遇到同样的困惑~~ shylook 最好用shRNA的vector吧 比如PLKO等等 不是的话 你要看载体自身带不带ATG 带
，然后我收集这些上清直接去感染肝癌细胞，24小时候也 能看到至少80%的细胞表达GFP，说明包装过程中所用的包装质粒，试剂以及细胞应该没 有问题。我现在有几个疑问，请有经验的战友指点： 1）师姐留给我的protocol上，转染HEK293FT的方法如下，以10cmdish为例： prepare the following transfection mix: 10.0 ug PLKO.1 shRNA plasmid 10.5 ug pLP1 10.5 ug pLP2 9.0 ug pVSVG
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