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- 文献和实验
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-20
- 保质期:
3个月
- 英文名:
MiaoLingBio
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1000
- 供应商:
淼灵生物
- 规格:
1管
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文献和实验已经成为体外基因组编辑的最流行系统,但体内的基因编辑方法仍然受到 Cas9 导入问题的限制。腺相关病毒载体(AAV)因免疫原性低而常用于基因的体内导入。不过,由于 AAV 只能容纳~4.5 kb,化脓链球菌(spCas9)和 gRNA(总共~4.2 kb)要包装到 AAV 载体中还是很有挑战性的。研究人员随后在 Cas9 的同源物中,找到了金黄色葡萄球菌的 Cas9(SaCas9),证明其在哺乳动物细胞中表现出切割活性。并且长度适合插入 AAV 载体中,效率与 SpCas9 相似,适合体内研究
(Lachnospiraceae)的 Cpf1 酶成为新的候选物。这一新发现的 Cpf1 系统有几个重要的方面不同于以往描述的 Cas9,Cpf1 系统更简单一些,它只需要一条 RNA。Cpf1 酶也比标准 SpCas9 要小,使得它更易于传送至细胞和组织内;Cpf1 以一种不同于 Cas9 的方式切割 DNA。当 Cas9 复合物切割 DNA 时,它切割的是同一位点的两条链,留下的「平端」在重新连接时往往会发生突变。原文检索:doi:10.1016 /j.cell.2016.12.038Science:基因编辑大牛张锋再发
RNA 靶向酶。Cas13b 具有靶向和编辑 RNA 的能力,仅需一个指导 RNA 即可找到靶标,并可靶向多个 RNA 转录本。该系统将使研究人员可以特异性地操纵 RNA,并以高通量的方式使用 CRISPR 研究广泛的生物学过程。 目前,已发现于 2018 年发现的Cas13d 家族可干扰哺乳动物细胞系中的 RNA 以实现基因沉默。与 RNA 干扰技术相比,Cas13d 介导的基因沉默具有更高的特异性和敲除效率。与 Cas9 介导的基因敲除技术相比,Cas13d 介导的基因沉默不会改变基因组 DNA
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