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文献和实验相关实验
在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
-27632(SCM075)添加到 7-10 mL 人 ES/iPS 扩增培养基(SCM130)中，终浓度为 10 μM。 用 为干细胞优化的ECM GEL(CC131-5ML)涂覆 6 孔板。 吸出培养基。用 2 mL 的 DMEM/F12 或 1X PBS 清洗孔壁。吸出并加入 1 mL Accumax™ (A7089)并将其添加至孔中。在 37̣ °C 下孵育 5-6 分钟。用手掌拍打孔板，以帮助解离结块细胞。 向孔中加入 1 mL 单细胞传代培养基（同步骤 1）。用 5 mL 移液管上下吹打
修饰蛋白质组学，团队在哺乳动物细胞内一共鉴定得到10个组蛋白Kpy位点以及78个非组蛋白Kpy位点；同时在大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞中均可检测到Kpy修饰信号，证明该修饰在进化上高度保守。 更重要的是，研究明确了丙酮酰化的酶学调控网络：HAT1、p300（EP300）作为Writer，以丙酮酰‑CoA为底物催化赖氨酸丙酮酰化；SIRT3作为Eraser负责去除该修饰，由此建立起 Kpy 完整的可逆酶促调控环路。细胞代谢扰动实验证实，Kpy整体修饰水平跟随糖酵解通量、胞内丙酮酸浓度发生动态升降
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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