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3个月
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MiaoLingBio
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1000
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淼灵生物
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1管
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文献和实验在基因功能研究过程中，常常使用的一种方法就是将目的基因转到靶细胞内进行瞬时表达（transient expression），以流式细胞仪检测细胞周期的变化，观察转基因对细胞增殖的影响。由于各种转基因方法的不同，转基因的效率也不同，往往是仅有一部分细胞可以表达目的基因，没有转基因的细胞将影响检测的结果。如何将已经转基因的细胞同未转基因的细胞区分开来进行检测，是一个技术上的难点。常用的一种方法就是将表达绿色荧光蛋白的质粒和目的基因共转染；在共转染时，加入目的基因表达质粒的量远高于表达GFP质粒
从“代谢废物”到“明星分子”： 揭秘乳酸荧光探针的迭代与演进
将eLACCO1中的cpGFP替换为cpmApple，构建出R-eLACCO0.1，随后经定向进化优化，大幅提升了ΔF/F，并筛选特定的 N 端前导序列（Igκ）和 C 端锚定结构（COBRA），进行膜定位优化，最终得到R-eLACCO2.1，其在体内对胞外乳酸浓度升高的敏感性优于此前绿色荧光探针。R-eLACCO2.1 作为新的红色荧光胞外乳酸探针不仅具备更深的组织穿透力，还实现了与绿色钙探针（GCaMP）的“光谱正交”，实现同步监测同一视野下神经元活动与胞外乳酸波动的因果关系。 图
表达His和sumo标签蛋白 pET28a+EGFP 大肠杆菌质粒 Kan 绿色荧光原核载体，0.1mM TPTG，20度诱导过夜 pET28a+DsRed2 大肠杆菌质粒 Kan 红色荧光原核载体，0.1mM TPTG，20度诱导过夜 pET28a+EYFP
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