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3个月
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MiaoLingBio
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1000
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淼灵生物
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1管
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文献和实验偶然发现的一个pQE30系统表达蛋白纯化案例，帖出来和大家分享。 Purification of LF. 诱导与表达 E. coli SG13009(pREP4) carrying the recombinant plasmid pPG-LF1 was grown at 37°C in Luria broth with 100 μg of ampicillin and 25 μg of kanamycin per ml at 250 rpm. When the A600
霉素乙酰化转移酶基因（chloramphenicol acetyl transferase gene，CAT），这个基因不带有启动子，通常不会被表达。根据菌株和载体的不同，会有少量的CAT活性被检测到。ColE1复制起点pQE-TriSytem不含有CAT盒（cassette）并利用pUC的复制起点，此载体含有三个启动子，可以分别在大肠杆菌、杆状病毒和哺乳动物中进行表达Qiagen表达载体的分类可以根据加入的标签的种类、位置以及利用何种蛋白酶进行标签切割来分类。在N末端加入标签这一系列载体的N末端加有标签，其中pQE-30、pQE-9带有6×
-1,pBADHis, pBADHislacZ，pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒：pCDFduet-1 以及pCDNA3.1，pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta（DE3），Rasettagame（DE3），Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒： pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
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