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文献和实验Nature 子刊：超声波调控肿瘤内细菌的基因表达，助力肿瘤免疫治疗
了一种超声响应性工程菌。测试结果表明，携带 mCherry 基因的工程菌在 37℃ 孵育后未产生任何荧光信号，而在 45℃ 孵育后可以观察到强烈的红色荧光信号，表明热诱导可以解除 TcI 的抑制启动 mCherry 基因的表达。将热诱导时间从 5min 延长到 25min，可见基因表达的荧光信号强度逐渐增加。 接着研究团队对超声参数进行了优化，结果表明在 4.93 MPa 声压下，超声 3s 间隔 5s 的辐照参数可以将靶区温度维持在 45℃。经优化后超声参数进行辐照细菌后，可见细菌表达荧
( 1 ) PRSETB 细菌表达质粒（Invitrogen ) : 用于 Ni-次氮基三乙酸（NTA ) 琼脂糖蛋白纯化的 His-tag；用于选择的氨苄青霉素和用于诱导蛋白质表达的异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷（IPTG )。 ( 2 ) pcDNA3 哺乳动物瞬时表达质粒（Invitrogen ) : 巨细胞病毒启动子和用于细菌选择的氨苄青霉素抗性基因。 2.2 生物化学和生物物理鉴定 ( 1 ) Luria-Bertani ( LB ) 培养基：10 g 胰蛋白胨，5 g 酵母
:分别是增强型绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/单体红色荧光蛋白,具有不同的激发波长发射波长为，均由野生型荧光蛋白通过氨基酸突变和密码子优化而来。就eGFP而言，相对于GFP，其荧光强度更强、荧光性质更稳定。同时载体中构建的Kozak序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。mCherry是从DsRed演化来的性能最好的一个单体红色荧光蛋白，可以和GFP系列荧光蛋白共用，实现多色标记体内、外实验表明，mCherry在N端和C端融合外源蛋白时，荧光蛋白活性和被融合
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