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- 2026年08月03日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
3个月
- 英文名：
MiaoLingBio
- 库存：
1000
- 供应商：
淼灵生物
- 规格：
1管
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文献和实验蛋白转位至自噬体膜，在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点，一个斑点相当于一个自噬体，可以通过计数来评价自噬活性的高低。 mRFP-GFP-LC3 双荧光自噬指示体系： mRFP-GFP-LC3 融合蛋白的病毒产品 mRFP 用于标记及追踪 LC3，GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体。由于 GFP 荧光蛋白对酸性敏感(pH 敏感)，当自噬体与溶酶体融合后 GFP 荧光发生淬灭,而 mRFP 相对稳定，因此只能检测到红色荧光。 1. 哺乳动物 LC3 表达质粒
系统应用最为常见，以CMV启动子构建的pcDNA3能在大多数哺乳动物细胞中高效表达所插入的外源基因，并且是高拷贝数质粒，为大量制备质粒DNA带来了方便。 (1)质粒骨架元件：表达质粒的复制起始位点是质粒自我复制的基础，它确定了在免疫细胞中质粒的拷贝数和质粒DNA的产生数。目前常用的复制起点是大肠杆菌质粒ColEI复制起点，该起点可确保质粒在大肠杆菌细胞中维持20个以上的拷贝数。 (2)启动子和增强子元件：启动子为重要的调控序列，是一段位于转录
影响外源基因在哺乳动物细胞中表达水平的因素很多，层次也很广泛，涉及复制、转录和转录后、翻译和翻译后等各级水平，其中mRNA的转录是真核基因表达谓节的基本控制点，它的翻译对表达水平也有一定作用。研究表明，所有提高转录水平的策略均与蛋白质编码序列无关，主要是通过载体构建基因转染方法和选择不同标记来调控。而提高翻译水平则主要是通过增强与核糖体结合能力和改造编码基因的结构来实现。转录水平的调控可以概括为顺式作用元件(cis acting element)与反式作用因子(trans-acting
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