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细胞学堂丨养不好RAW 264.7，是因为忽略了这几点，RAW264.7分化有哪些问题要注意

养过 RAW 264.7 细胞系的小伙伴，都容易为一个问题感到苦恼：它太容易分化了！到底怎样才能养好它呢？RAW264.7 细胞培养注意事项有哪些，今天我们就给大家分享一些心得。    RAW264.7 细胞培养之基础篇 RAW264.7 细胞培养的第一步，是要对它的基础培养条件了如指掌，比如生长特性、细胞形态、所需的培养基，甚至培养环境、传代比例等等，做到知己知彼，才能百战百胜。                                 ▲产品详情  细胞系：RAW 264.7  

种草一款无细胞蛋白质表达试剂盒

先来看下传统重组蛋白表达系统： 传统重组蛋白表达系统应对的挑战： 操作流程长：5天-4周时间 很多蛋白不能在细胞内成功表达 不可以改造目标蛋白   以大肠杆菌为代表的原核蛋白表达系统是常用的表达系统，具有表达量高和成本低的优点，但是蛋白质翻译后缺乏加工机制（比如形成二硫键和蛋白糖基化等），且很难保留生物活性。 以甲醇毕赤酵母为代表的酵母蛋白表达系统，具有表达量高，可诱导，糖基化机制接近真核生物等优点，但是部分蛋白产品易降解，表达量不可控。 哺乳动物细胞和昆虫

为什么得不到 IL-1β 结果？这 5 个关键点你要知道

易溶解。4) 室温敞开管子放置 30 分钟以让丙酮挥发完全。5) 1X SDS 上样缓冲液溶解沉淀，然后 WB 检测。WB 步骤中需注意处1) 使用 16.0%Tris-Glycine 胶或 4-20% 的梯度胶电泳。2) 对于活化的 IL-1β，转膜时不要转膜过度而导致丢失。建议使用 0.2um 孔径的膜。 若是湿转，CST 一般使用条件是 70V/250 mAmps ，2 hours； 若是半干，使用 25V，7 分钟。3）其它细节参见相应 CST 的各个 IL-1β 抗体产品页面上详细步骤。要点：富集培养