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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详见说明书
- ATCC Number：
抗人IgM小鼠杂交瘤细胞；3C6品牌
- 细胞类型：
A类
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 供应商：
上海抚生
- 库存：
59
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
低温冷藏
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
详见说明书
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 英文名：
详见说明书
- 规格：
株
细胞名称 抗人IgM小鼠杂交瘤细胞；3C6品牌
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生单克隆抗体，抗原为人IgM。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 保持细胞密度在1×105～1×106 cells/ml之间，每周换液2～3次
传代情况 不详
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
抗人IgM小鼠杂交瘤细胞；3C6品牌细胞总RNA的提取
1）、6孔板细胞（CNE-2）汇合度为90-100%时，取出无菌室，去其上清，用PBS洗两次后，每孔加TRIZOL试剂 1 ml，摇匀，无菌罩内消化3-5分钟（观察：液体变粘稠，细胞脱壁）。
2）、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中，加新开的氯仿0.2 ml，轻摇15秒。
3）、室温静置2-3分钟后，12000 rpm，15 min，4℃，离心。然后取上清无色水相（约0.6 ml）到 EP管（DEPC处理过），加0.5 ml新开的异丙醇，室温下静置10分钟。
4）、12000 rpm，10分钟，4℃，离心。观察总RNA在管底的白色沉淀，弃去上清（小心别丢了沉淀），75%乙醇1.0 ml洗涤（用DEPC水新配制）后，7500 rpm，5 min，4℃离心。
5）、去上清，点离，用小Tip吸干液体。气干沉淀5-10分钟， DEPC处理水20-30 ul加入，中枪打匀,按实验方法流程60℃水浴10分钟溶解总RNA，测OD值。
6）、电泳。
抗人IgM小鼠杂交瘤细胞；3C6品牌的操作流程:
1. 细胞收到后建议在培养箱稳定4小时左右再依据细胞密度，换液培养或传代。
2. 如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞及时离心，加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶中继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基，培养2-3天。若3天后细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡，请及时联系实验室，技术人员会跟进解决。
3. 贴壁细胞生长缓慢：适当提高血清浓度（最高不超过20%），或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养。
4. 生长不均：贴壁细胞若出现生长不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重新打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
细胞周期的概念:
细胞周期是可再生细胞从准备时期到分裂为两个细胞的一个循环阶段。
细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期，细胞间期较长，而细胞分裂期较短。
FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清)，对细胞而言差异极大，请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。
本公司所经营产品均为科研产品，为科研实验使用，抗人IgM小鼠杂交瘤细胞；3C6品牌不得用于人体注射，服用等，望注意，谢谢合作！
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VNN2 VNN2 / Vanin-2 鼠单抗 (FITC) Human
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Rhesus antibody Rh Phospho-SRF (Ser103) 磷酸化生长激素释放因子抗体(血清应答因子) 规格 0.1ml
Goat Anti-Guinea IgG 羊抗豚鼠IgG (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格： 1mg
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文献和实验―杂交瘤技术、DNA重组技术等。 单抗的制备首先将抗原注射人小鼠体内，然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B细胞，与小鼠骨髓瘤细胞在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下融合，再在特定的选择性培养基中筛选出杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质，因此，它不仅具有B细胞分泌特异性抗体的能力，还有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的本领。由此可以获得足够数量的细胞。 单抗的制备过程 1，抗细胞表面分子的单抗 这类抗体能识别和结合表达特定膜表面分子的细胞
1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交瘤细胞既可产生抗体，又可无性繁殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体，由于每种抗原都有几个抗原决定簇，用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体，即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来
3.异种动物 例如用人IgM作为Ab1免疫小鼠制备单克隆Ab2。由异种动物免疫制备的Ab2血清中，除抗Id外还含有抗同种型的抗体。 （三）抗独特型抗体的检测 抗Id抗体的鉴定至关重要。通常采用免疫学检测方法如ELISA、RIA、免疫荧光和中和试验等，可根据具体条件和需要加以选用。抗Id的鉴定必须设置充分的对照，确保检测结果的可靠性。例如，在鉴定小鼠源性抗原特异性人IgM抗独特型抗体时，用正常人IgM作为对照。将Ab1（抗原特异性人IgM）包被微孔板，然后加检测样品（小鼠源性抗Id
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