- 询价
- 酶联免疫吸附试验（ELISA）
- 全国
- 2025年07月15日
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
天津津科生物科技有限责任公司
- 服务名称：
酶联免疫吸附试验（ELISA）
（一）目的和原理
ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
（二）仪器设备
1) 聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔；
2) 酶联免疫检测仪；
3) 50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶；
4）36℃恒温箱，坐标纸等。
（三）
1）去离子水
2）ELISA试剂盒
（四）操作流程
1）标本收集
（1）收集血液的试管应为一次性的无热源，无内毒素试管
(2 ) 血浆抗凝剂推荐使用EDTA
(3 ) 避免使用溶血，高血脂标本
(4 ) 收集标本后若不及时使用，请分装并储存于-20~-70℃
2）检测前准备工作
（1）提前20分钟取出试剂盒，平衡至室温
(2 ) 将浓缩洗涤用双蒸水稀释（1:20），未用完放回4℃
(3 ) 标准品：加入标准品/标准品稀释液1.0 mL至一支冻干标准品中，静置15分钟，待其溶解，轻微混匀（浓度为1000pg/mL)，然后根据需要用量进行稀释
(4 ) 生物素化抗体工作液：按当次实验所需要的用量，使用前20min，以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体（1:30）
（5）酶结合物工作液：按当次实验所需要的用量，使用前20min，以酶结合物稀释液稀释浓缩酶结合物（1:30）
3）洗涤方法
（1）自动洗板机：要求注入的洗涤液为350ul，侏儒语系持股间隔15~30s，洗板5次
(2 ) 手动洗板：甩尽孔内液体，在结晶的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350 ul，静置30秒甩尽液体，在后迭吸水纸上拍干，洗板5次
4）操作步骤
（1）从以平衡至室温的密封袋中取出实验所需板条，未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内压实自封条，放回4℃
(2 ) 空白孔加标本或标准品稀释液，其余相应孔中加标本或不同浓度标准品（100ul/孔），用封板胶纸封住反应孔，36℃孵箱孵育90分钟
(3 ) 提前20分钟准备生物素化抗体工作液
(4 ) 洗板5次
（5）空白孔加生物素化抗体稀释液，其余空加入生物素化抗体工作液（100ul/孔）。用封板胶纸封住反应孔，36℃孵箱孵育60分钟
(6 ) 提前20分钟准备酶结合物工作液，避光室温放置（室温22~25℃）
(7) 洗板5次
(8 ) 空白孔加酶结合物稀释液，其余空加入酶结合物工作液（100ul/孔）。用封板胶纸封住反应孔，36℃孵箱避光孵育30分钟
（9）打开酶标仪，预热仪器，设置检测程序
(10 ) 洗板5次
（11 )加入显色底物100ul/孔，36℃孵箱避光孵育15分钟
(12 )加入终止液100ul/孔，混匀后即可测量OD450值（3分钟），读数并保存
（五）注意事项
1）在使用试剂盒时，从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，维加热至40℃使结晶完全溶解再配制洗涤液。
2）充分混匀对反应结果尤为重要，最好使用微量振荡器。
3）标准品分装后保存于-20~-70℃，避免反复冻融。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验Reagents : PBS (pH 7.3) Coating Solution: 0.1 M Sodium Carbonate (pH9.6) with 0.02% Sodium Azide Wash Solution: 0.9% NaCl-0.05% Tween 20 (NaCl/T) PBS-TA: PBS-Tween 20 (0.05%) - sodium azide (0.02
免疫酶联吸收试验（ ELISA ）于 1971 年分别由瑞典学者 Engrall 和 Perlmann 、荷兰学者 Van Weeman 和 Schuurs 报道。其基本原理是把抗原或抗体在不损坏其免疫活性的条件下预先结合到某种固相载体表面；测定时，将受检样品（含待侧抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物；反应终止时，固相载体上酶标抗原或抗体被结合量（免疫复合物）即与标本中待检抗体
相关专题 ELISA免疫实验技术 1. ELISA 的原理 ELISA 的基础是抗原 或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
