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- 艾恩斯
- 0.13 mIU/ml
- INS1030202
- 湖北黄石
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
黄石市艾恩斯生物科技有限公司
- 样本：
血清、血浆、细胞培养上清液
- 库存：
71
- 标记物：
HRP
- 适应物种：
人
- 应用：
仅供科研使用，定量检测
- 检测方法：
双抗原夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）
- 检测范围：
0.13 mIU/ml
- 规格：
96T
仅供科研使用，不得用于临床检验。
人乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）定量检测试剂盒（ELISA）说明书
货号：INS1030202
使用前，请务必仔细阅读说明书，如有不清楚的，请拨打24h技术支持专线：0714-6338558或18171667592/18108699172，咨询清楚再进行实验。
黄石市艾恩斯生物科技有限公司
网址：www.inselisa.com
电话：0714-6338558
【产品名称】
通用名称：人乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）定量检测试剂盒（ELISA）
英文名称：Human Hepatitis B virus Surface Antibody（HBsAb） ELISA KIT
【包装规格】
48人份/盒，96人份/盒
【预期用途】
仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）的浓度。
【检验原理】
本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被人乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）（固相抗原，货号：INS1030202C）的微孔酶标板中，加入人乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）校准品（货号：INS1030202J）和待测样本，再加入另一株HRP标记的人乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）（酶标抗原，货号：INS1030202E），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗原-抗体-酶标抗原的夹心复合物。加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中人乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）的浓度正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中人乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）的浓度。
【主要组成成分】
主要成分
| 组分 | 数量 | 主要成分 |
| 校准品 | 0.5ml/管*6管 | 抗原配制的6个浓度标准品 |
| 包被微孔板 | 96T | 预包被固相抗体 |
| HRP标记抗原 | 6mL | HRP标记的检测抗原 |
| 底物液A | 6mL | 过氧化脲工作液 |
| 底物液B | 6mL | TMB工作液 |
| 20×浓缩洗涤液 | 30mL | 含0.15%Tween20的PBS |
| 说明书 | 1份 | -- |
| 自封袋 | 1个 | -- |
| 不干胶 | 2片 | -- |
需要但未提供的材料及耗材
1、酶标仪
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml量筒
7、无粉一次性乳胶手套
8、质控品（可从艾恩斯生物科技产品研发系统中选择）
【储存条件及有效期】
1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。
2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
3、开封后，按照建议的条件保存，校准品、包被微孔板和HRP标记抗体，有效期为14天，其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。
【适用仪器】
半自动的酶标仪，如Thermo MK3，或者国产酶标仪。
【样本要求】
样本类型和采集
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1、细胞培养上清：4000rpm条件下离心20min，去除细胞颗粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反复冻融。
2、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，4000rpm条件下离心20min，小心地分离出血清，保存在- 20℃以下，避免反复冻融。
3、血浆：肝素，EDTA，或柠檬酸钠作为抗凝剂。在4000rpm条件下，离心20分钟取上清，血浆保存在-20℃以下，避免反复冻融。
样本保存和稳定性
样本在2-8℃条件下，可以储存72h，或者在- 20℃储存6个月。样本收集后，不是一次检测完，请按一次用量分装冻存，避免反复冻融，使用时在室温下解冻，确保样品均匀充分解冻。
【检验方法】
试剂准备
1、使用前，所有的组分都要至少复温30min，确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液：从冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水，按1:20稀释，即1份的浓缩洗涤液，添加19份的蒸馏水。
3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1体积充分混合，混合后15分钟内使用。
操作程序
1、所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
2、按前面试剂准备中描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。
3、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
4、设置标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL，样本孔加待测样本50μL，空白孔不加。
5、除空白孔外，标准品孔和样本孔，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
6、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
7、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20s，甩去洗涤液，吸水纸上拍干。
8、如此重复4次（共洗板5次）。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。
9、将底物A和B按1:1体积充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育15min。
10、所有孔加入终止液50μL，在酶标仪上读取各孔吸光度（OD值）。
【检验结果的解释】
检测完成后，以标准品浓度做为纵坐标，对应的吸光度（OD值）作为横坐标，利用计算机软件，采用四参数Logistic曲线拟合（4-pl），创建标准曲线方程，通过样本的吸光度（OD值），利用方程计算样品的浓度值。
如果样品被稀释，通过上述方法测的的浓度值，要乘以稀释倍数，才是样品的最终浓度。
【检验方法的局限性】
1、仅供科研使用，不得用于临床诊断。
2、在试剂盒标示的有效期内使用，过期产品不得使用。
3、跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。
4、使用试剂盒配套的样品稀释液。
5、如果样本值高于最高标准品浓度值，请将样本适当稀释后，再重新测定。
6、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果，检测前，请排除该因素。
7、通过其他方法得到的检测结果，与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
【产品性能指标】
1、物理性能
试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装，无破损漏气。
2、剂量反应曲线线性
校准品剂量反应曲线相关系数r值，大于等于0.9900。
3、精密度
批内精密度：三组已知的高、中、低浓度样品，进行二十次在同一个板块内精度评估。批内变异系数CV%小于10%。
批间精密度：三组已知的高、中、低浓度样品，进行二十次在不同板块内精度评估。批间变异系数CV%小于15%。
4、灵敏度
最低检出剂量小于0.13 mIU/ml。
5、回收率
三组已知的高、中、低浓度样品，进行五次回收率评估，回收率在85%-115%之间。
6、特异性
本试剂盒识别天然和重组人乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb），与结构类似物无交叉。
7、稳定性
2℃-8℃保存，有效期6个月。
【注意事项】
生物安全
1、检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染，所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。
2、试剂盒的液体组分中，含有proclin-300防腐剂，可能引起皮肤过敏反应，避免吸入烟雾与皮肤接触。
3、底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入烟雾。戴上防护手套，实验完成后彻底洗手。
技术提示
1、混合蛋白溶液时，避免起泡。
2、加校准品与样本时，每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头，公共组分应该悬臂加样，避免交叉污染。
3、合适的温育时间，和充分的洗涤步骤，是保证实验结果准确性的必要条件。
4、底物溶液为无色液体，保存过程中变为蓝色，代表底物溶液已经失效，不得使用。
5、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致，加入终止液后，蓝色底物产物，会瞬间变为黄色。
6、实验中，用剩的板条，应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
7、所有液体组分，使用前充分摇匀，严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。
废物处理
所有使用或未使用的试剂，所有污染性的一次性材料，应当遵循传染性或潜在传染性产品的处理程序，每个实验室都有责任根据其实验的类型和危险性级别，进行废物和污物的处理，同时要严格依照有关规定对待所有的废物和污物。
【基本信息】
企业名称：黄石市艾恩斯生物科技有限公司
生产地址：湖北省黄石市黄石港区磁湖路41号
固定电话：0714-6338558
网 址：www.inselisa.com
邮 箱：postmaster@inselisa.com
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文献和实验相关实验
评价，对乙肝的预防起到监督作用。HbsAb的含量在10mlU/ml以上病人ELISA检测即可呈阳性结果，但并不提示机体都一定具有免疫力，而HBsAb 的含量在10—100mlU/ml之间的样本，定性虽为“阳性”，但此时机体对HBV的免疫力较弱，甚至不能预防HBV感染。只有HbsAb的含量达到100mlU/ml以上时才可确定具有抵抗HBV入侵的作用。作定量检测，可根据HBsAb 的含量判断机体对HBV的免疫状态及乙肝疫苗的免疫效果。因此定量测定对乙肝疫苗免疫力的评价和高危人群预防免疫具有重要意义
【摘 要】目的 了解电化学发光法（ECL）检测乙肝病毒标志物的应用价值。方法 用ELISA法和ECL法平行测定360例疑似乙肝病人血清乙肝五项标志物，并对ELISA法检测为阴性而ECL法检测为低浓度HBsAg的标本，再用微粒子酶免分析法（MEIA）进行复测并分析。结果 ELISA法和ECL法对HBsAb、HBeAg、HBeAb三项标志物的检出率无显著性差异，但对HBsAg的检测，ECL检出率明显高于ELISA法（P〈0．05）。ELISA检测为阴性而ECL法检测为低浓度HBsAg的标本
：以HBsAg为1，HBsAb为2，HBeAg为3，HBeAb为4，HBcAb为5。其中1、5阳性模式检出率分别为3.92％，10.78％，差异有显著性（P0.05）。（2）对HBVM中的各项目用这两种方法检测的结果进行对照。TRFIA法的检测阳性率均略高于ELISA法，但都差异无显著性（P>0．05），对HBsAg、HBsAb、HBcAb的检出符合率为100％。HBeAg、HBeAb用ELISA法检出率相对较低，漏检率为7.84％（8/102）。 三、讨论HBVM的变化是评估乙型肝炎感染后病情转归
人乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）定量检测试剂盒（ELISA）
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