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958
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1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
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冷藏
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")15kb plus DNA ladder(250~15000bp)供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:15kb plus DNA ladder(250~15000bp)供应
规格:100T(2×250μl)
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:RFT012
本产品是由10条带状双链DNA条带组成的DNA Ladder,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。10条带大小包括250,500,1000,1500,2500,4000,5000,7500,10000,15000bp。其中2500bp条带为100ng/5μl,其余条带浓度50ng/5μl。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注:根据梳子的厚度和宽度进行上样。
每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl;
窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl;
宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl;
如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子,可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为0.8-1.0%,凝胶长度10cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间35-40分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
我公司的15kb plus DNA ladder(250~15000bp)供应,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
BTN130985 免DNA提取PCR试剂盒 Cell Lysate PCR Mix
淀粉样物质染色液(甲紫法) 2×50ml
亚硝基红盐 Gly-Gly-Val 525-05-3
J0302 兔抗猴IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
DEAE葡聚糖凝胶A-50 VC
ARB10577 人成熟促进因子(MPF)elisa测定使用说明书 Human matuRation promoting factor,mpf ELISA KIT
PY02-376 EE肉汤Mossel培养基(USP) 250克
三(3-磺酸*基*基)膦 m-Methyl red 63995-70-0
DN4201 蛋白酶K
5-硝基尿嘧啶 L-Methionine 611-08-5
生理盐水(哺乳动物专用,无菌) 500ml
ARB10318 人中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)定量分析 Human neutrophil activating protein-2,nap-2 ELISA KIT
A8016-19 大鼠血清Rat Serum
胰蛋白酶溶液(含酚红) 0.05%|0.25% 100ml
15kb plus DNA ladder(250~15000bp)供应关键词:250~15000bp,RFT012,15kb plus DNA ladder(250~15000bp),百奥莱博
·5×TBE
编号:RFT190
规格:500ml|10×500ml
本品常用于DNA琼脂糖凝胶电泳。
·低分子量蛋白Marker II(14.4~116KD)
编号:RFT048
英文名称:Low Molecμlar Weight Protein Marker II
规格:20T(100μl)
本产品包含7种已知分子量的标准蛋白质组成,分子量范围为14.4kD-116kD,可以用来判断 SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本成品由于含有SDS,不适于非变性胶蛋白电泳(Native PAGE)。
使用说明:
1、第一次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用。
2、-20℃取一管样品,彻底融化,95℃处理5分钟后立即上样。
注:
a.一次热处理后,未用尽样品-20℃保存;下次使用时只要室温完全融化混匀后即可上样,可以不用再加热处理。然而,如出现带型缺失现象或样品聚集在分离胶上沿,可在Marker中加入终浓度为50mM的DTT,95℃处理5分钟后再上样。
b.上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
3、电泳结束后,染色,观察结果。
注:使用银染时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,可以适当降低Marker上样量。
储存条件:-20℃。
15kb plus DNA ladder(250~15000bp)供应关键词:250~15000bp,RFT012,15kb plus DNA ladder(250~15000bp),百奥莱博
·RIPA裂解液(强)
编号:RFT156
英文名称:RIPA Lysis Buffer
规格:100ml
本品是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种,根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。RIPA裂解液(强)的主要成分为50mMTris (pH 7.4),150mMNaCl,1% Triton X-100,1% sodiu*(代"m") deoxycholate,0.1% SDS,以及sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
使用方法:
对于培养细胞样品:
1、融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2.1、 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
2.2、对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3、充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。
对于组织样品:
1、把组织剪切成细小的碎片。
2、融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3、按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4、用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5、充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6、如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈涡旋使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
注意事项:
1、为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2、需自备PMSF。
3、裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
储存条件:-20℃,有效期一年。
我公司正在优惠促销核酸电泳和回收等系列产品,期待您的咨询选购15kb plus DNA ladder(250~15000bp)供应。
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文献和实验;还有一个原因是你设置的电压太高,最好是2~4v/cm,跑4~6小时比较合适(2)“我是按说明书上0。8%的琼脂糖”:凝胶浓度太低了,把凝胶浓度加大到2%,放心做,没问题的(3)“说明书上说混合温和”:那是怕你混匀太剧烈导致细胞基因组DNA断裂啊,注意很轻轻的混匀(4)“收集凋亡细胞时离心时转速”:我在实验室中是5000rpm,离心5min,我觉得足已mmyycc :我的ladder总是只有一条带,与对照组差别不大,用的是100v,1-1.5h,不知道是不是这个原因?溴酚兰跑到什么位置合适
相关专题 DNA Ladder是细胞凋亡 时产生的一些DNA片段,经过特定内切酶的酶切作用后,在电泳凝胶上产生多条核酸片段的条带,由于电泳图性状成梯形,因此称为DNA Ladder。DNA Ladder的产生与细胞凋亡密切相关,因此也可以利用DNA Ladder来判断细胞凋亡的标准。 例一 gongyulai :我用的是药物诱导癌细胞凋亡,做DNA Ladder(用的是北京鼎国的动物细胞凋亡梯子提取
发生细胞凋亡时,内源性核酸酶被激活,染色体DNA链在核小体之间被切割,形成180~200个碱基或其整数倍的DNA片段,将这些DNA片段抽提出来进行电泳,可得到DNA梯状条带(DNA ladder)。 一、材料与试剂 凋亡细胞; 蛋白酶K(500μg/ml) 8mol/L 醋酸钾 白细胞裂解液:pH8.0,10mmol/L Tris-HCl,10mmol/L NaCl,10mmol/L EDTA,1% SDS。 氯仿 无水乙醇,70%乙醇; 2%琼脂
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