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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
810
- 英文名:
Bone tissue RNA Extraction Kit
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货快速提取骨RNA试剂盒厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货快速提取骨RNA试剂盒厂家
规格:50次
编号:ALH042
英文名:Bone tissue RNA Extraction Kit
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本试剂盒适用于快速提取骨组织细胞总RNA,骨组织坚硬、骨细胞密度低、而且外周基质含有大量黏蛋白(蛋白多糖)和RNA难以分离,无法用传统Trizol法进行高质量提取。本试剂盒采用独特的不含*酚/*仿配方的裂解液,并添加多种成分去除骨组织蛋白多糖。同时独特基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,离心沉淀去除多糖和次级代谢产物,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,然后RNA被选择性洗脱滤过, 吸附在基因组DNA清除柱上的残留DNA无法洗脱连同柱子一起丢弃从而清除掉DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷,单个样品操作一般可在35分钟内完成,世界上最简单快速的试剂盒。
3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.适应性广泛,可以提取各种骨组织包括矿化骨组织。
5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot,二代测序和各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 50次 |
| 裂解液CLB | 50ml |
| Plantbalb | 5ml |
| 裂解液RLT Plus | 25ml |
| 去蛋白液RW1 | 40ml |
| 漂洗液RW | 10ml |
| RNase-free H2O | 10ml |
| 吸附柱和收集管 | 50套 |
| 基因组DNA 清除柱和收集管 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇,研钵或者其它合适的破碎骨组织装置。
3. 样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到100%无残留),本试剂盒RNA 提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup) ,请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。
储存条件:室温,有效期12个月
本品别名:骨RNA提取试剂盒|骨组织RNA提取试剂盒|快速提取骨RNA试剂盒|骨组织RNA快速提取试剂盒
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文献和实验/RNA同时加到吸附柱上去。如何去除DNA是第一个难点。否则会残留大量DNA。两个技术难点的没有掌握导致了国内公司包括的第二种试剂盒失败。国外公司因为没有掌握第一难点,裂解液里面没有去除多糖多酚成分,所以包括Qiagen的RNeasy plant mini kit盒子也常常不能成功提取较复杂植物RNA样品如黑加仑、冬青等植物样品。 北京艾德莱生物的研发人员经过3年的不断研发改良,针对多糖多酚植物的特点,和这两种试剂盒失败的原因,开发出了世界领先水平的RN09 EASYspin植物RNA快速提取
填补Qiagen空白的植物RNA提取试剂盒(包括多糖多酚困难样品)
,和这两种试剂盒失败的原因,开发出了世界领先水平的RN09 EASYspin植物RNA快速提取试剂盒。第一:采用直接过柱子方法,彻底抛弃了TRIzol苯酚,氯仿原理方法,使用无毒原料,并且添加了有自主知识产权的去除多糖多酚成分解决了多糖多酚和代谢产物对于RNA的破坏和干扰分离。第二:突破了直接过柱子的方法DNA去除的技术难点,解决了DNA残留过多问题。经过实践过程中,几十种国内外试剂盒包括Qiagen的RNeasy mini kit 提取失败的例子,包括棉花苹果等试剂盒不易提取的样品,使用北京艾德莱生物
、和trizol原理不同,直接过柱法DNA/RNA同时加到吸附柱上去。如何去除DNA是第一个难点。否则会残留大量DNA。两个技术难点的没有掌握导致了国内公司包括的第二种试剂盒失败。国外公司因为没有掌握第一难点,裂解液里面没有去除多糖多酚成分,所以包括qiagen的盒子也常常不能成功提取植物RNA样品。 北京艾德莱生物的研发人员经过3年的不断研发改良,针对多糖多酚植物的特点,和这两种试剂盒失败的原因,开发出了世界领先水平的EASYspin植物RNA快速提取试剂盒,第一采用直接过柱子方法,彻底抛弃
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