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北京现货血液RNA提取试剂盒优惠价

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  • ¥100 - 1890
  • 百奥莱博
  • BTN3071-TBW
  • 北京
  • 2025年07月13日
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      778

    • 英文名

      Blood RNA Extraction Kit

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      常温运输,4℃保存,溶液B和溶液C有腐蚀

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货血液RNA提取试剂盒优惠价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京现货血液RNA提取试剂盒优惠价
    规格:50次
    编号:BTN3071
    产地:国产|进口
    英文名:Blood RNA Extraction Kit
    本试剂盒是专门从全血样品中快速提取总RNA的试剂盒,主要用于提取全血细胞的总RNA(提取血浆病毒RNA 需使用病毒RNA提取试剂盒,提取纯化后的白细胞RNA可使用动物RNA提取试剂盒)。

    试剂盒特点:
    1. RNA 无明显降解和DNA污染,OD260/280 均在1.9以上。血液RNA的产量与动物种类和动物的状态(如有疾病与否)有很大关系,人全血产量为2-6μg/mL,兔全血产量为5-10μg/mL。
    2. 操作简单,直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品,不需裂解红细胞等任何预处理步骤,整个提取过程只需要十多分钟,可以全在室温下进行。
    3.处理量大,每管的样品处理量可以达到1.5mL,高于进口的同类产品。
    4.与常用的抗凝剂(包括肝素,EDTA,柠檬酸*,草酸*)兼容,得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern杂交等研究。

    试剂盒组成:

     
    成分 50T
    溶液A 50ml
    溶液B 15ml
    溶液C 25ml
    溶液D 25ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃保存,溶液B和溶液C有腐蚀性。4℃保存的溶液A可能会产生白色沉淀,用前需65℃水浴加热直到沉淀溶解。有效期一年。

    使用方法:
    1. 将0.2-1.5mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到1.5mL塑料离心管中,15000g室温离心3分钟,弃上清(血浆)。如果此时血液细胞沉淀体积大于0.2mL,则需要减少血液的使用量,具体减少量需根据具体情况决定,因为各个个体(尤其是患者)血液中白细胞数目差别很大。如果提取0.1mL以下的微量血液样品最好加入百奥莱博的微量助沉剂RNApp。
    2. 将1mL溶液A加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
    3. 将0.3mL的溶液B和0.2mL *仿加入离心管,剧烈震荡30秒。
    4. 13000-15000g室温离心5分钟,将上清液(为无色或浅红色,约0.5-0.9mL)转移到另一干净离心管中。为防止污染,最好留100μl左右的上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
    5. 加入0.5mL的溶液C和0.2mL的*仿到上清液中,用手上下剧烈摇晃30秒。
    6. 13000-15000g室温离心3分钟,将上清液(无色,约1mL)转移到另一干净离心管中,避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物(蛋白质)。可以按每次吸取100-200μl的方式分批转移。
    7.在上清液中加入1/2 体积的溶液D,用手上下剧烈摇晃30秒,溶液将呈白色浑浊状。
    8. 13000-15000g室温离心5-30分钟,小心移弃上清液,避免触及管底大量的白色RNA沉淀。
    9.在离心管中加入1mL 75%乙醇,振荡器上振荡混均30秒。室温离心13000-15000g 1分钟,RNA 此时在管底形成细小沉淀。小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
    10. 重复第9 步的75%乙醇清洗步骤一次。
    11. 短暂快速离心数秒使管壁上残留液体沉到管底(约50μl),用移液枪小心吸弃,注意不要吸弃沉淀。此步十分重要,因为残留的乙醇会影响后续反应。
    12.室温短暂放置2分钟,立即加入适量(一般为10-30μl)溶解液使RNA沉淀溶解。建议使用具有灭活残留RNase 功能的新型RNA 溶解液液相RNase Scavenger 而不要使用经典的DEPC 水。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则RNA将变得十分难溶。RNA样品可以直接使用,也可以存放于-80℃长期保存。

    疑难解答:
    1.有的样品在第4 步离心后有很厚的中间层,上清很少。原因是蛋白质变性不充分,可以适当减少血液的用量。白细胞多的血液容易产生这种情况。
    2.有的样品在加入溶液D离心后,沉淀上浮在液面,这是由于液体的比重大于沉淀,可以加入少量的超纯水使溶液的比重降低,直到沉淀能下去为止。也可能把下层的有机相取上来了,如果这样需要重做。
    3.千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则将变得十分难溶。
    4.无论使用甲醛变性胶还是非变性胶电泳时,一定要使用RNA变性/上样液(如百奥莱博的RNAload)以让RNA 充分变性,否则加样孔中会有RNA复合物(人们会误以为是DNA污染)。使用没有变性能力的DNA上样液不能使RNA 复合物分离。
    5.测OD时一定要使用pH8.0的缓冲液(如TE),不要使用微酸性的DEPC水,否则OD 值会比真实的值低15-20%。

    更多有关北京现货血液RNA提取试剂盒优惠价的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
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    DP433 血液总RNA提取试剂盒
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    BL1062 乳糖胆盐培养基
    碱性磷酸酶封闭液(乙酸法)   100ml
    BL1197 结晶紫染色液(2.5%)
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    DL-正缬*酸 Phenylpyruvic acid 760-78-1
    北京现货血液RNA提取试剂盒优惠价关键词:血液RNA提取试剂盒,Blood RNA Extraction Kit,BTN3071


    ·柱式质粒DNA提取试剂盒
    编号:BTN60205
    英文名称:Plasmid DNA column extraction kit
    规格:50次
    本试剂盒是用于质粒DNA小量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理,再通过离心吸附柱,专一结合DNA,最后洗去杂质,高效快速提取质粒DNA,全*(代"套")操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒可从1-5mL过夜培养的菌液纯化得到高达20μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0),可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。

    试剂盒特点:
    1.快速、步骤少,整个操作在半个小时之内完成。
    2. 不需要预平衡离心吸附柱。
    3. 洗柱液即开即用,不需要额外加乙醇。
    4. 纯度高,采用本试剂盒提取的质粒OD 比值在1.8-2.0 之间。
    5.产量高,每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5μg/mL。
    6. 用途广,适用于低拷贝和高拷贝质粒。
    7. 价格低,比多数国内同类产品的价格更便宜。

    试剂盒组成:
    成分 规格
    溶液A 13ml
    溶液B 13ml
    溶液C 18ml
    RNase A溶液(10mg/mL) 0.15ml
    通用洗柱液 50ml
    DNA洗脱液2.0 10ml
    离心吸附柱,6层 50只
    说明书 1份


    储存条件:常温运输和保存,RNase A 需要-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1. 先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中,摇匀后再取用,未用完的溶液A最好在4℃保存。
    2.从筛选平板上挑取单菌落至含抗生素的培养基中,37℃震荡培养12-16小时(摇床转速200-300)。注意:建议使用LB培养基,营养更丰富的培养基会使菌体浓度过高,超过纯化系统处理能力而降低DNA 质量。另外,延长培养时间有利于提高质粒DNA浓度,但是菌液培养过长时间会因细胞死亡、裂解而造成质粒DNA浓度降低。
    3. 用1.5mL离心管收集1-4mL 过夜培养饱和菌液,室温12000rpm离心1分钟,弃上清,再短暂离心,吸弃残留液体。
    4. 加入250μL溶液A,用枪头充分吹打使菌体重悬(此步在冰上操作效果更佳)。
     注意:细胞未充分悬浮会影响后续操作,可以使用漩涡振荡器帮助混匀或使用Tip 吸头吹打沉淀至完全混匀。
    5. 加入250μL溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀4-6次,看到溶液变粘即可,然后冰上放置不超过4-5分钟。注意:此步处理不能超过5分钟,否则DNA的碱损伤比较严重。同时千万不要剧烈振荡,否则基因组DNA 断裂产生的片段非常容易污染质粒DNA。溶液B用后需要将盖拧紧存放,否则空气中的二氧化碳会进入溶液,形成碳酸,中和溶液B中的NaOH,降低其效率)。
    6. 加入350μL 冰上预冷的溶液C,反复颠倒混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后冰上放置至少5分钟。
    7. 最高转速(12000rpm以上)4℃离心5分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。如果此步的离心在室温进行,更容易出现沉淀物漂浮的现象。
    8. 静置2分钟以让质粒DNA与吸附柱充分结合,此步十分重要。
    9.室温12000rpm离心1分钟,弃收集管中的废液。
    10. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000rpm离心1分钟,弃收集管中废液。
     注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。
    11. 重复上步1次。
    12.室温12000rpm离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
    13. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管(自备)中,加入30-100μL65-80℃预热的DNA 洗脱液2.0,室温放置2分钟。常温的DNA 洗脱液2.0也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。
    14.室温12000rpm离心1分钟,离心管底溶液即质粒DNA。
    15. 由于百奥莱博的吸附柱结合DNA 能力较强,如果再加适量DNA 洗脱液2.0 到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多质粒DNA(相当于第一次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的DNA洗脱液2.0来洗脱。


    北京现货血液RNA提取试剂盒优惠价关键词:血液RNA提取试剂盒,Blood RNA Extraction Kit,BTN3071


    ·Methacarn固定液
    编号:BTN131291
    英文名称:Methacarn Fixative Solution
    规格:250mL
    本产品为甲醇、*仿、乙酸等混合固定液。Methacarn固定液对核内抗原的保存效果较好,适用于某些抗原、癌基因蛋白产物检测的固定。固定时间应根据组织块大小确定,一般室温固定4-24小时。

    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期半年。

    ·中等RIPA裂解液
    编号:BTN131007
    英文名称:RIPA Lysis Buffer(Medium)
    规格:250mL
    RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强,对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果,本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表:
    产品名称 RIPA裂解液(强) RIPA裂解液(中) RIPA裂解液(弱)
    有效裂解成分 1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS 1% NP-40,0.5% deoxycholate,0.1% SDS 1% NP-40,0.25% deoxycholate
    裂解强度 温和
    对膜蛋白的提取 很好 较好 一般
    对胞浆蛋白的提取 很好 很好 很好
    对核蛋白的提取 很好 较好 较好
    胞浆磷酸化蛋白提取 很好 很好 很好
    细胞核转录因子提取 很好 很好 很好
    含蛋白酶抑制剂
    含磷酸酯酶抑制剂
    主要用途 WB,IP WB,IP WB,IP,co-IP


    储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。

    使用方法:

    对于培养细胞样品:
    1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
    2. 裂解细胞
    2.1 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
    2.2 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
    3. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
    注意:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。

    对于组织样品:
    1. 把组织剪切成细小的碎片。
    2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
    3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
    4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
    5. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
    6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
    注意:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。

    备注:
    1.为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
    2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
    3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒,不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。



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