48方孔板

大神教你瞬时转染快，准，狠！

加入六孔板中； 4~6h 后换成正常血清培养基（忌放抗生素），在培养箱内培养； 48h 后提取 RNA 或者 72h 提取蛋白，或者 48h 后进行后续相关实验。 三、流程图 四、答疑 师兄， 转染为什么不能加抗生素？ 答：抗生素，比如青霉素和链霉素，一般对于真核细胞无毒，但阳离子脂质体试剂（Opti-MEMI）增加了细胞的通透性，使抗生素可以进入细胞。这降低了细胞的活性，导致转染效率低下。所以在转染的时候不允许加入抗生素。   师兄，转不进去怎么办？ 答：有以下几种情况： 1）转染

【求助】将报告基因质粒转染到癌细胞中，是否都要共转染一个带有抗性基因的质粒来筛选阳性克隆？

太大了，还是我理解错了？ xdb86 共转染一个有抗性基因的质粒是用来校正转染效率和蛋白量的，就像我们做western的内参actin一样。报告基因分析不需要筛选阳性克隆。 质粒使用量的问题：1个六孔板一孔是要用1到2微克，做报告基因分析时一般不需要用六孔板，太浪费了，24孔板或48孔板就可以了，48孔板转染120ng报告质粒就可以了。 从商家买回来的质粒不是叫你一次就用完的，买回来的只是种子，可以无限制在感受态细菌里扩增的。

献给初学者：大神教你瞬时转染如何快，准，狠

液 2ml 加入六孔板中；4.4-6h 后换成正常血清培养基（忌放抗生素），在培养箱内培养；5.48h 后提取 RNA 或者 72h 提取蛋白，或者 48h 后进行后续相关实验。实验流程图答疑解惑1. 师兄, 转染为什么不能加抗生素？答：抗生素, 比如青霉素和链霉素, 一般 对于真核细胞无毒, 但阳离子脂质体试剂（Opti-MEMI）增加了细胞的通透性, 使抗生素可以进入细胞。这降低了细胞的活性, 导致转染效率低下。所以在转染的时候不允许加入抗生素。2. 师兄，转不进去怎么办?答：有以下几种情况