副猪嗜血杆菌荧光定量PCR检测试剂盒

副猪嗜血杆菌荧光定量PCR检测试剂盒产品特点
副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)属巴斯德氏菌科嗜血杆菌 属，是一种依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)且没有运动性的小型、多形性、 革兰氏阴性杆菌。HPS 可引起猪多发性浆膜炎、关节炎，严重时导致体温升 高、呼吸困难甚至死亡, 给养猪业带来巨大的经济损失。目前对 HPS 的诊断 主要是细菌分离培养和 PCR。HPS 培养需要 NAD、马血清和 5% CO2 环境， 需 24-36 小时，还容易出现杂菌污染，因此 PCR 是目前诊断 HPS 最常用的 方法。本产品就是基于 PCR 的 HPS 检测试剂盒，它具有下列特点： 1. 灵敏度高，分析灵敏度可以达到 50 拷贝/uL，远高于细菌培养法。 2. 特异性高，根据 HPS 的 16S rDNA 基因保守区设计引物，可扩增出强、 中和弱毒力的各种 HPS 血清型，但不会误检猪链球菌 2 型、猪伤寒沙门 氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌等常见无关细菌。 3. 一管封闭式，避免了 PCR 产物对后续 PCR 的污染。 4. 线性范围广，在 10-107拷贝/uL 的靶分子浓度范围内均呈线性。 5. 简单快捷，只需要 2 小时即可得到实验结果。

副猪嗜血杆菌荧光定量PCR检测试剂盒使用方法 一、样品 DNA 的制备
用自选方法纯化 HPS 样品的 DNA，也可以另购本公司的细菌 DNAout
或柱式细菌 DNAout，上述两款产品跟本试剂盒兼容。
二、制备 HPS 标准曲线
1. 标记 6 个离心管，分别为 1,2,3,4,5 和 6 号。
2. 用带芯分别加入 45 uL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
3. 在 1 号管中加入 5 uL HPS 阳性对照(本试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟。
4. 换枪头，从 1 号管中取 5 uL 溶液到 2 号管中，充分震荡 1 分钟。
5. 换枪头，从 2 号管中取 5 uL 溶液到 3 号管中，重复上面的操作直到得到
6 个稀释度的样品。
6. 从 6 个管中分别取 5 uL 进行定量 PCR（见下步），每个样品最好重复 3
次。