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己糖激酶(HK) (EC2.7.1.1)技术问答
问:组织样本是怎么收集的?
答:样本的采集,取组织块,(一般需要0.2g以上)在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸吸干,准确称重,放入冻存管或离心管中-20度可以保存3个月,-80度可以保存半年。
问:在做ELISA时,配套96孔板被用完了,可以用其它的96孔板代替吗?稀释标准品的时候是怎么稀释的?。通过什么来确定这组数据可用或不可以用?
答:ELISA配套的酶标板上是包配抗体的,所有用完了就没有了,不可以用其它的96孔板代替,稀释标准品的时候您可以倍比稀释,取5根管子,里面各加120ul的标准品稀释液,然后从第5根管子开始,加120ul的标准品,混匀,从以稀释好的第5根管子里吸120ul到第4根管子里,这样一直到第一根管子。我们是根据您做的标准曲线成不成线性来判断这组数据可以用还是不可以用的。
问:做淀粉酶(AMS)实验时,测定管和空白管吸光度的差值一般控制在什么范围内就被认为值可以用?
答:一般的我们在做AMS时,测定管和空白管的吸光度OD值差值控制在0.05-0.150之间。被确定为可以用。
问:总抗氧化能力,能用酶标仪测吗?
答:不可以,总抗氧化能力容易浑浊,对光径也有要求,也没有标准品。
问:做got/gpt时标曲线一定要做吗?
答:我们说明书上的标准曲线,是给老师你做参考用的,不同的仪器做的标曲都不一样,所以为了您实验的准确性必须得做
问:测组织时为什么还要加测蛋白浓度?测血清时为什么不加测蛋白浓度?
答:因为测组织时要先匀浆,匀浆的程度不一样释放出的蛋白也不一样,我们测蛋白就是为了校正匀浆破碎的程度,而测血清时是不需要匀浆的所以不用加测蛋白浓度。
问:NO试剂盒测房水中NO可以吗?
答:如果可以,那标本取材有要求吗,比如:取的量50微升左右可以吗?保存条件?根据您们的经验是取一次做一次,还是可以全取完再一起做?
2、关于实验时的波长:必须是550还是可以有一个波动范围呢?
3、有些文献提到用硝酸还原酶法后在用“荧光计数法”计算,有必要吗?
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文献和实验DNA and RNA Ligases (EC 6.5.1.1, EC 6.5.1.2, and EC 6.5.1.3)
Ligases are a class of enzymes that catalyze the joining of nucleic acid molecules by the formation of phosphodiester bonds between their termini (1 ). The nucleic acid substrate to be linked may be DNA or RNA depending on the type of ligase
为催化己糖 6位上由 ATP使之产生磷酸化反应的酶。 EC 2. 7. 1. 1。其反应过程是: 己糖 ATP→己糖 -6-磷酸 ADP 对α- D葡萄糖的亲和性很高( Km=1× 10- 5 M),对其他的己糖也可进行磷酸化。此反应的平衡向右偏移。△ G°’ =4.0千卡。该酶广泛存在于以糖为能源的细胞,但在酵母、肝脏、肌肉、脑等最多。该酶可被结晶化。分子量约为 9万 6千(酵母己糖激酶)。可被 Mg2 、 K 所活化,但可被 HS试剂阻抑
Deoxyribonuclease I (EC 3.1.21.1) and II (EC 3.1.22.1)
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