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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温避光
- 保质期:
长期
- 英文名:
小量质粒提取试剂盒
- 库存:
9999
- 供应商:
上海圻明生物
- 规格:
科研试剂
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设计PCR用引物时的注意事项:
1. 引物长度通常为20~25 mer。但进行LA PCR时,引物长度应增长为30~35 mer。
2. 二条引物之间不能进行Annealing,对3′端的3个碱基需特别注意
3. GC含量在50~60%,避开局部富含GC或AT,为了使引物和模板稳定结合,3′端应避开AT rich结构
4. 避开引物自身形成二级结构
5. 选择Tm温度相互接近的二条引物
PCR用引物的Tm值的计算方法?
引物为20 mer以下时:Tm = 2℃×(A+T) + 4℃×(G+C)
引物为20 mer以上时:Tm = 81.5 + 0.41×(GC%) - 600/L , 其中L为引物的长度。
在PCR反应过程中选择Annealing温度时,一般为 (Tm - 5)℃。
PCR用引物的使用量?
合适的终浓度可在0.1 μM~1.0 μM之间选择。引物的浓度太低时,有时扩增产物太少;引物浓度太高时,比较容易出现非特异性扩增反应。通常模板DNA的量较多或High complexity DNA (例如Human genome DNA) 作模板时,引物浓度应低一些;当模板DNA的量较少或Low complexity DNA (例如Plasmid等)作模板时,引物浓度应高一些。
简并性引物对PCR扩增有无影响?
有影响。简并数量应尽量少。通常一条引物中简并的碱基不要超过4处,如果简并的碱基数过多,则会造成反应体系中有效引物的量相对减少,此时应适当增加引物的使用量。但引物量过大,容易引起非特异扩增。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 新鲜血液样品( 200 μl )2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
【基本原理】此试剂盒用于质粒DNA小量纯化。该试剂盒采用了传统的SDS碱裂解法,结合DNA制备膜技术,具有高效、快速、方便之特点,全套操作只需1小时便可完成。使用本试剂盒可从1-4ml 的过夜培养的菌液中纯化得到1~20μg的高纯度质粒DNA,此质粒DNA可直接用于DNA序列分析以及各种酶促反应等。【器材】1.离心机2. Spin Column3. Collection Tube (2ml)*1初次使用试剂盒时,请将RNase A1全部加入到SolutionI中,混合均匀后4℃保存。*2若出现
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









