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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
BCA蛋白定量试剂盒
- 库存:
9999
- 供应商:
上海圻明生物
- 规格:
科研试剂
组分
组分名称 数量 保存
BCA Reagent A 100 ml 室温
BCA Reagent B 1 ml× 2 室温
BSA 标准品(2 mg/ml) 1 ml× 2 -20℃
储存
BCA Reagent A和BCA Reagent B置于室温保存,BSA蛋白标准品置于-20℃可保存一年。
主要特征
便捷快速:与Lowry法相比,该方法可在1 小时内完成蛋白质定量检测,工作液配制后24h内使用无影响。
灵敏准确:测定范围是20~2000 μg/ml(562 nm读数)。在测定范围内有良好的线性关系,变异系数小。
兼容性好:与Bradford法相比,对去垢剂耐受能力大为提高,在Tween20低于4%,NP40低于5.0%,SDS低于4%,Triton X-100 低于4%的浓度范围内,即可获得准确定量结果(其余物质耐受度详见说明书)。使用微板法测定时将体积按比例减小。
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文献和实验法是十分常用的蛋白质比色定量方法,很多试剂供应商都提供基于比色皿和微孔板的BCA蛋白定量试剂盒。BCA蛋白定量法相对于其它比色定量法具有操作简单、稳定、灵敏度高等优点。相对于蛋白质的固有的280nm吸收峰检测,BCA检测法提高了蛋白检测灵敏度和特异性,消除了核酸的干扰,核酸干扰在对细胞裂解物或其他生物样品进行蛋白定量时总是一个难以避免的干扰。在碱性条件下,蛋白将Cu2+ 还原为Cu+ ,Cu+ 与BCA 试剂形成紫色络合物,如图1,其吸光值与蛋白浓度成正比。测定在562nm 处的吸收值,并与标准
蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。为验证细胞裂解是否成功,或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存,需对细胞裂解液进行蛋白定量;为了判定蛋白的产量,需对纯化好的蛋白进行定量;为了将纯化好的蛋白用生物素或者报告酶进行标记,同样需首先对蛋白样品进行定量,以保证标记反应在适当的化学浓度下进行。现今有很多商品化的蛋白定量试剂盒,如BCA定量试剂盒等,操作起来,简便快捷。当然也有不少实验室,还是采用传统的方法进行蛋白定量。现将蛋白定量过程中所遇的一些问题小结一下。Q1: 采用考马斯亮蓝G5-20
对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂),匀浆后抽提总蛋白(或核蛋白)。实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂)抽提总蛋白(或核蛋白)。2. 蛋白质定量:按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE):将准备好的样品液和预染
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