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- 文献和实验
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- 库存:
528
- 英文名:
10×BalbBlot Rapid Transfer buffer
- 保质期:
1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应10×BalbBlot快速转膜液价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:10×BalbBlot快速转膜液价格
英文名:10×BalbBlot Rapid Transfer buffer
规格:500ml
品牌:百奥莱博
编号:RFT081
产地:国产|进口
本快速转膜液使用独特配方,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF或硝纤膜)上。使用湿转法(Tank blot)或半干转法(Semi-dry blot)方法,能在15-35分钟内完成转膜过程。
产品特点:
1、快速和环保:快速转膜液不使用甲醇,减轻了对实验者和环境的伤害。
2、兼容性好:快速转膜液能兼容Laemmli胶,预制胶,Bis-Tris胶等多种凝胶。
3、转移效率高:快速转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有很好的转移效率,有效解决了大小蛋白不能在同一张膜上同时转移的问题。
使用方法:
转膜前的准备:
5-6张裁好的滤纸;裁好的转印膜;足够的1×快速转移buffer
一、湿转法(Tank blot):
1、按照下表配制1×快速转膜液
| 1×快速转膜液配制量 | |||
| 100 ml | 500 ml | 1000 ml | |
| 10×快速转膜液 | 10 ml | 50 ml | 100 ml |
| 无水乙醇 | 20 ml | 100 ml | 200 ml |
| 超纯水 | 70 ml | 350 ml | 700 ml |
2、将滤纸和海绵浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿。
3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。
注意:水中漂洗时间一定不能超过2分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
4、按照以下顺序做好转印三明治结构:
—>负极(阴极)
—>一块海绵
—>2mm滤纸
—>凝胶
—>转印膜
—>1mm滤纸
—>一块海绵(根据三明治的厚度选择是否使用)
—>正极(阳极)
注意:
a.要彻底清除三明治结构中的气泡,适当补加1×快速转膜液保持三明治结构湿润。
b.PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。
c.三明治结构的制作不能太紧,也不能太松。太紧和太松都会影响转印效果。如果太紧的话,可以去除阳极一侧的海绵或滤纸。
5、将三明治结构放于转移槽中。
注:转移槽中可以不用1×快速转膜液,可以用1×TGS(Tris-Glycine-SDS)电泳缓冲液取代。三明治结构中的快速转膜液足够保证转膜的完成。
二、半干转(Semi-dry blot):
1、按照下表配制1×快速转膜液:
| 1×快速转膜液配制量 | |||
| 100 ml | 500 ml | 1000 ml | |
| 10×快速转膜液 | 10 ml | 50 ml | 100 ml |
| 无水乙醇 | 20 ml | 100 ml | 200 ml |
| 超纯水 | 70 ml | 350 ml | 700 ml |
2、将滤纸浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿。
3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。
注意:水中漂洗时间一定不能超过2分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
4、按照以下顺序做好转印三明治结构:
—>负极(阴极)
—>下层滤纸
—>凝胶
—>转印膜
—>上层滤纸
—>正极(阳极)
半干转时,滤纸、胶、膜之间的大小,一般是下层滤纸>=膜>=胶>=上层滤纸。上下两层的滤纸一定不能接触;滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡。接触的滤纸和气泡会造成短路。
注意:PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。
三、转移条件:
推荐使用恒流转移
| 电流 | 转移时间 |
| 300 mA | 30 to 35 min |
| 330 mA | 25 to 30 min |
| 350 mA | 25 to 30 min |
| 375 mA | 20 to 25 min |
| 400 mA | 15 to 20 min |
储存条件:18~25℃,有效期1年。
我公司的10×BalbBlot快速转膜液价格,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·1.5M Tris(pH8.8)
编号:RFT059
规格:100ml|500ml
本品用于SDS-PAGE配制分离胶用。
·四环素盐*(代"酸")盐溶液(50mg/ml)
编号:RFT185
英文名称:Tetracycline HCl Solution
规格:5×1ml
四环素类抗生素主要是与细菌核糖体30S亚单位的A位特异性结合,阻止tRNA在该位置上的联结,阻止肽链延伸,从而抑制细菌蛋白质合成。四环素类还可引起细胞膜通透性改变,使得重要成分外漏,从而抑制细菌生长繁殖。四环素盐*(代"酸")盐的水溶性好,生物利用度比四环素碱好,故常用于临床及研究领域。四环素盐*(代"酸")盐溶液由四环素盐*(代"酸")盐溶于水组成,经0.22μm过滤除菌,可以直接添加到培养基中。一般工作浓度为10~50 μg/ml,其中严紧型质粒常采用10 μg/ml,松弛型质粒常采用50 μg/ml。
使用方法:
根据实验具体要求操作,一般四环素在LB中终浓度为10~50μg/ml。可以大体按照1/1000 LB体积加入50mg/ml Amp溶液,如100ml LB中加入100μl 四环素 50mg/ml。
注意事项:
1、尽注意无菌操作,避免污染。
2、避免反复冻融。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4、*离子是四环素的拮抗剂,四环素抗性菌的筛选应使用不含*盐的培养基(如LB培养基)。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
10×BalbBlot快速转膜液价格关键词:10×BalbBlot Rapid Transfer buffer,10×BalbBlot快速转膜液,RFT081
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10×BalbBlot快速转膜液价格关键词:10×BalbBlot Rapid Transfer buffer,10×BalbBlot快速转膜液,RFT081
·Western半干转转膜液
编号:RFT079
英文名称:Western semi dry membrane fluid
规格:10×1L
本Western半干法转膜液是一种安全无毒的转膜液,没有使用剧毒的甲醇,也没有使用其它的有毒试剂。配制Western 半干法转膜液的方法非常便捷,不需要调节pH值。本Western转膜液共1瓶,可以配制1升1×Western半干转膜液,用于Western时半干法电转膜。
使用方法:
1、取一瓶可以配制1升Western转膜液的粉剂,倒入到一洁净的烧杯中,加入蒸馏水到约700毫升,溶解。
2、再加入200毫升无水乙醇或210毫升95%乙醇,混匀。
3、然后在量筒中用蒸馏水定容到1升。混匀后即可使用,无需调节pH值。没有用完的转膜液可室温或4℃保存,通常两周内使用没有任何问题。当转膜液颜色变为浅棕色或黄褐色时,应该丢弃。
注意事项:
1、配制好的半干法转膜液可室温或4℃保存。配制好的半干法转膜液长期存放后,如果颜色变成浅棕色或黄褐色,应丢弃。
2、需使用分析纯级别的乙醇或纯度更高的乙醇。
储存条件:室温,有效期2年。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购10×BalbBlot快速转膜液价格。
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文献和实验1. 准备:分别准备泡膜和转膜用的试剂和用具,在电泳槽中倒好转膜液 2.揭胶:电泳结束后,将电泳槽移至水池中,倒掉电泳液,将内槽提起放在水池边,取出两边玻璃板。用纯水冲干净玻璃板,小心揭开短板,去掉集成胶,小心将胶转入转膜液在中。 3.转膜:将夹子打开,黑色在底,依次放置海绵、滤纸、胶、膜、滤纸、海绵,关好夹子(均在液面下进行,注意气泡)快速放入架子中。在电泳槽中放冰袋。 4.电泳。 封闭及孵抗体: 1. 转膜等待时 准备封闭液(即Non-fat milk 5% in TBST
,因此务必使用中心区域的孔,并避免使用边缘附近的孔影响稳定性。比如说,使用的是 96 孔板(12×8 孔),就只使用中心的 60 孔(10×6 孔)进行实验。 图 1.载物台上式培养箱 2.通过创造稳定的环境温度改善聚焦效果 需要考虑的因素是室内温度,细微的温度变化也会影响到成像性能。 显微镜的环境温度稳定性对于活细胞的高倍率观察尤其重要。由于高数值孔径观察的景深较浅,因此即使温度变化造成很小的Z漂移,系统也可能会因此离焦。 为了优化环境条件,开始实验之前请确保打开空调并保持室温稳定。另外为了提高
Buffer Salt Tween20 ,1L) 10×TBS 100ml Tween 1ml 蒸馏水定容1L 4、10×转膜液(1L) Tris碱 30.3g Gly (甘氨酸) 150.1g 加水定容至1L 用时取100 mL ,加甲醇200 mL ,在定容1L 即为1 × 5、4×Loading buffer 0.5M Tris-HCl (pH 6.8) 2.5ml
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