北京现货Long Taq DNA聚合酶供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货Long Taq DNA聚合酶供应在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京现货Long Taq DNA聚合酶供应
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：RFT098
规格：500U|5×500U
英文名：Long Taq DNA Polymerase
本品是由pfu DNA 聚合酶和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成。两种酶协同作用实现了扩增效率、合成速度和延伸性能的完美统一，可以合成超长的DNA片段。当扩增具有复杂的二级结构(GC rich等)的模板或具有重复序列的模板时，使用GC buffer进行PCR扩增将非常有效。另外，此酶具有比Taq DNA聚合酶约5倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A，可以通过TA克隆法进行克隆。

产品组分：
Long Taq DNA Polymerase(5U/μl)————————100μl
2×GC buffer(含Mg2＋)—————————————1ml

活性定义：1单位(U) Long Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

贮存液：50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol

使用方法;
1. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

 

成分	体积	终浓度
Template	0.1-1μg	as you wish
Primer 1(10μM)	1μl	200nM
Primer 2(10μM)	1μl	200nM
2×GC buffer	25μl	1×
dNTP Mixture(10 mM)	1μl	200μM each
Long Taq (5 U/μl)	0.5-1μl	2.5-5U
ddH2O	up to 50μl	-

2. 混匀后，离心快甩将反应液收集到管底。
3. PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
4. PCR仪上执行以下程序：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	1-5 min	1
变性	94℃	30 sec	25-40*
退火	Tm-5℃*	30 sec
延伸	72℃	1 min/kb
最后延伸	72℃	5 min	1

注：PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

储存条件：-20℃，有效期一年。

北京现货Long Taq DNA聚合酶供应极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·JM110化学感受态细胞
编号：RFT114
英文名称：JM110 Competent cell
规格：20×100μl
本公司生产的JM1110感受态细胞采用经特殊工艺处理得到，可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测，转化效率可达108cfu/μg，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。

基因型：rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacIq lacZΔM15]

产品特点：
1、JM 110 是一种甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株，使DNA 不被甲基化，使用其转化所得到的质粒DNA，可被对dam、dcm 甲基化敏感的限制酶切割。
2、只适用于转化质粒DNA。
3、细胞具有硫*(代"酸")链霉素(Strr) 抗性。

操作方法：(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1、取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100μl感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入目的DNA(50μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置45秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3分钟，该过程不要摇动离心管。
4、向每个离心管中加入500μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)， 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟)，目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5、将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收，倒置平板，37℃培养12—16小时。

注意：涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多，可取更少量转化产物涂布平板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200—300μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少，可通过离心(4000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)

注意事项：
1. 感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免感受态细胞的转化效率。
2. 进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3. 为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到最低。

储存条件：-70℃，有效期6个月。


北京现货Long Taq DNA聚合酶供应关键词：RFT098,Long Taq DNA聚合酶,Long Taq DNA Polymerase

Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH8.0)   500ml
ARB13765 鸭主要组织相容性复合体(MHC)血清中含量检测 Duck major Histocomp*(代"a")tibility complex,mhc ELISA KIT
半胱*酰甘*酸 Celite 545 19246-18-5
PY02-199  曙红亚甲基蓝琼脂  250克  
CYB163029 羊抗人IgG、A、M-RBITC
Fmoc-D-天冬酰胺 3-Phenylpropanoic acid 108321-39-7
ARB10172 人VIT A 含量检测 
ARB14110 人肌肉生长抑制素(MSTN)检测服务 
酒石酸** Metribuzin 6381-59-5
BL0772 (66-669)高分子量 marker Protein mixture(原装) 
ARB13616 兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA代测服务 Rabbit intercellular adhesion molecule 3,icam-3 ELISA KIT
ARB11688 人葡萄糖氧化酶(GOD)血清中含量检测 Human glucose oxidase,god ELISA KIT
甲**(代"胺")蓝O Tetraterbium heptaoxide 92-31-9
PY06-005  大肠杆菌与大肠菌群显色培养基Ⅲ  1000ml，用于大肠杆菌和大肠菌群快速计数(MPN法)
ARB13165 小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)酶免分析 Mouse heat shock protein 40,hsp-40 ELISA KIT
北京现货Long Taq DNA聚合酶供应关键词：RFT098,Long Taq DNA聚合酶,Long Taq DNA Polymerase


·PCR产物纯化试剂盒
编号：RFT031
英文名称：PCR product purification kit
规格：100次|200次
本试剂盒采用离心吸附柱结合独特的缓冲液系统，从酶切、PCR等反应溶液中纯化DNA片段，同时除去蛋白质、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒可回收100bp–10kb的DNA片段，回收率大于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率为30－50%)。每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量约为10μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

试剂盒特点：
1、结合液PB为亮黄色，便于观察体系的pH是否合适。
2、操作快捷，单个样品操作少于10分钟。

操作步骤：
如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、在PCR反应液中直接加入5倍体积的PB液，颠倒混匀后，全部加入到吸附柱CA2中，10000g离心30-60秒，到掉收集管中的废液，将吸附柱CA2重新放入收集管中。
注意：
a.如果PCR反应体系使用了石蜡油，无需去除，但要使用10倍体积的PB液。
b.如果反应体系小于50μl，用水补至50μl体系，再加入PB液。
c.如果体系体积大于700μl，请分次上柱，保证全部溶液均加入到吸附柱中。
2、向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，10000g离心30-60秒，倒掉废液，将吸附柱重新放入收集管中。
3、向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW，10000g离心30-60秒，倒掉废液。
4、将离心吸附柱CA2放回收集管中，10000g离心2分钟，尽量除去漂洗液。
注意：此步必不可少！如果漂洗液有残留，将会影响回收效率和DNA质量，进而影响下游实验；离心后将吸附柱盖子打开，室温放置2分钟，这样将有助于彻底挥发残余乙醇。
5、将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟。10000g离心2分钟收集DNA溶液。
注意：
a.可将洗脱缓冲液EB预热到60-70℃后再加到吸附膜上，这样可以提高洗脱效率。
b.CA2柱的洗脱体积不应少于20μl，体积过小将会降低回收效率。
c.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率
6、DNA产物-20℃保存。

储存条件：室温，有效期12个月。

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