5×双色蛋白上样缓冲液(还原)品牌

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名称：5×双色蛋白上样缓冲液(还原)品牌
产地：国产|进口
英文名：5×DualColor Protein loading buffer (reducing)
编号：RFT070
规格：5×1ml
5×DualColor蛋白上样缓冲液(双染料)是5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液，应用于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有两种示踪染料：*酚蓝和吡啰红Y，可以指示SDS-PAGE电泳过程以及Weastern blot的转膜效率。该缓冲液已经加入DTT，可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂，经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。

操作步骤
融化-混合-变性-上样
1、将5×双色蛋白上样缓冲液37℃数分钟解冻后轻轻摇匀，以确保溶液混合均匀。
2、将缓冲液与蛋白样品按照1：4的比例混匀。
3、将蛋白样品置于95℃中加热5分钟。
4、待蛋白样品充分变性后冷却至室温，快甩离心收集到管底，直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内电泳。

注意事项：
1．由于含有DTT，该缓冲液不适合于Native SDS-PAGE电泳。
2. 一般说来，电泳中吡啰红Y泳动速度快于*酚蓝，但在高浓度SDS-PAGE胶中(高于15%分离胶)，吡啰红Y泳动速度慢于*酚蓝。

储存条件：-20℃。

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·4×蛋白上样缓冲液(非变性胶)
编号：RFT066
英文名称：4×Native-PAGE protein loading buffer
规格：10×1ml
本制品是蛋白质样品进行 Native-PAGE(非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶)电泳用的上样 Buffer。制品中含有示踪色素*酚蓝，可以确认电泳的进行情况。使用本制品，蛋白质在电泳胶中可以得到很好地分离。电泳后用考马斯亮蓝或者银染色等方法染色后，蛋白质电泳带能够得到清晰显示。非变性蛋白质电泳时，蛋白质的迁移速度与其固有的分子量、分子的形状及所带的电荷量等有一定关系。

使用方法：
使用前，先离心快甩使溶液至管底，以防开盖后造成污染。
向6μl的蛋白质样品中加入本制品 2μl(本制品与蛋白质样品按照 1：3的体积比混合)，振荡混匀后稍离心，即可上样电泳。本制品使用方便，可以根据蛋白质样品和电泳胶孔的体积，按照上述比例调整本制品的使用量。

注意事项：
1、为了您的安全，使用时请使用一次性手套操作，注意防护！
2、本制品不适用于变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶蛋白电泳。

储存条件：-20℃，避光。

·即用型DAPI染色液
编号：RFT199
英文名称：DAPI Stain Solution
规格：10ml
本品是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。本DAPI染色液为即用型，可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。

DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。 DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。 DAPI的最大激发波长为340nm，最大发射波长为488nm；DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为364nm，最大发射波长为454nm。

操作步骤：
1、对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的DAPI染色。
2、对于贴壁细胞或组织切片，加入少量DAPI染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。
3、室温放置3-5分钟。
4、吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
5、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。

注意事项：
1、本DAPI染色液的浓度经过优化，确保可以满足各种常规染色的需要。
2、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

储存条件：-20℃避光，有效期12个月。

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