- ￥380 - 3800
- 百奥莱博
- SY0254-JFC
- 北京
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
322
- 英文名：
2×RNA Loading Buffer(Without Ethidium Bromide)
- 保质期：
1个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
RT可稳定保存1周，4℃可
- 规格：
5×1ml
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文献和实验；用 3 倍柱容积的 DEPC-H2O 洗柱，再用 1×上样缓冲液洗柱，至洗出液 pH（2）将 RNA 溶液在 65 ℃ 加热 5 min，然后迅速冷却至室温，加入等体积的 2×上样缓冲液，混合后直接上样，并收集流出液。重复此过程 2-3 次以使 mRNA 更充分地结合到纤维素上；（3）用 2～3 倍柱容积的洗脱缓冲液洗脱 mRNA；（4）加入 1/10 容积的 3M NaAc (pH5.2) 于 mRNA 洗脱液中，混合后加入 2.5 倍体积的冰冷无水乙醇，混匀后-20 ℃ 沉淀 30 min
于上佳的上样缓冲液中，可产生相等或预期强度的条带，并且不含有条带污点，无染色阴影。与此相反，分子量标准 #1 采用较老技术制造，并存在于次优组分的缓冲液中。 b. 样品和标准品准备 须计算上样到凝胶中的 DNA 量，以确保目的条带良好分离，并用于可视化和检测。虽然用荧光染料足以检测 1 - 100 ng/条带的 DNA，但最小可检测量取决于 所用染料(了解更多: 核酸染色特性）[2]。注意，样品或标准品的超载会造成条带污点并遮盖附近条带，从而导致条带分辨不清，特别是片段大小相似时(图 2A)。 图
①电泳RNA 所用器械如制胶的模具、梳子、电泳槽等用肥皂粉洗干净后用双蒸水冲洗二遍后在室温晾干备用。②用新的1XTBE 配制1. 2 %琼脂糖凝胶,倒胶时溴化乙锭(E 直接加入凝胶中。③制备好的琼脂糖凝胶板放入电泳槽后再加入经高压灭菌过的1XTBE ,液面只能刚好同胶面平齐,缓冲液不要淹过胶面。④点样时,样品RNA 每10μl 加入2μl 上样缓冲液,上样缓冲液是用DEPC 处理的水配制的50 %甘油,另外单独点一样品孔含有3μl 溴酚蓝的上样缓冲液作为电泳指示剂,电泳电压4 V/ cm
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