猪脑源性神经营养因子(BDNF) ELISA试剂盒

试剂盒检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被样本抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
联系电话：15527510518 18163548455 13296670271 13296673586
QQ：1546342329  3176445674 
1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1.  试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.  浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成

名称	96孔配置	48孔配置	备注
微孔酶标板	12孔×8条	12孔×4条	无
标准品	0.3mL*6管	0.3mL*6管	无
样本稀释液	6mL	3mL	无
检测抗体-HRP	10mL	5mL	无
20×洗涤缓冲液	25mL	15mL	按说明书进行稀释
底物A	6mL	3mL	无
底物B	6mL	3mL	无
终止液	6mL	3mL	无
封板膜	2张	2张	无
说明书	1份	1份	无
自封袋	1个	1个	无

注：标准品浓度都不相同，麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备
 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1.  手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

 
试剂盒性能
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：最低检测浓度小于（参考说明书）
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月

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鸡促生长激素释放激素(GHRH)酶联免疫试剂盒 
鸡甘露糖受体C2 (MRC2)酶联免疫试剂盒 
鸡骨成型蛋白7 (BMP-7)酶联免疫试剂盒 
鸡视网膜母细胞瘤抑制蛋白(PRB)酶联免疫试剂盒 
鸡白介素23 p40 (IL-23 p40)酶联免疫试剂盒
鸡唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素3(SIGLEC3)酶联免疫试剂盒
鸡半乳凝集素8(GAL8)酶联免疫试剂盒
鸡强啡肽(Dyn)酶联免疫试剂盒 
鸡金属硫蛋白1E (MT1E)酶联免疫试剂盒
鸡极低密度脂蛋白受体(VLDLR)酶联免疫试剂盒
鸡转移因子(TF)酶联免疫试剂盒 
鸡粘蛋白1(MUC1)酶联免疫试剂盒
鸡结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒 
鸡组织蛋白酶C(CTSC)酶联免疫试剂盒  
鸡内脂素(VF)酶联免疫试剂盒
鸡蛋白聚糖4(PRG4)酶联免疫试剂盒
鸡生长分化因子1(GDF1)酶联免疫试剂盒
鸡巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β)酶联免疫试剂盒 
鸡肿瘤相关抗原(TAA)酶联免疫试剂盒 
鸡组织多肽特异性抗原(TPS)酶联免疫试剂盒 
鸡TATA框结合蛋白相关因子1(TAF1)酶联免疫试剂盒
鸡生长分化因子15(GDF15)酶联免疫试剂盒
鸡精氨酰tRNA合成酶(RARS)酶联免疫试剂盒
鸡TATA框结合蛋白相关因子2(TAF2)酶联免疫试剂盒
鸡神经特异性烯醇化酶(NSE)酶联免疫试剂盒
鸡趋化因子CC受体样蛋白1(CCRL1)酶联免疫试剂盒
鸡Ⅲ型胶原(COL3)酶联免疫试剂盒 
鸡生长激素诱导跨膜蛋白(GHITM)酶联免疫试剂盒
鸡颗粒酶K(GZMK)酶联免疫试剂盒 
鸡趋化因子C-C-基元配体14(CCL14)酶联免疫试剂盒 
鸡过氧化还原酶2(PRDX2)酶联免疫试剂盒
鸡内皮素受体B(ETRB)酶联免疫试剂盒
鸡磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)酶联免疫试剂盒 
鸡核孔蛋白85kda(NUP85)酶联免疫试剂盒
鸡磷脂酶D2(PLD2)酶联免疫试剂盒
鸡神经保护因子(CVNPF)酶联免疫试剂盒  
鸡基质金属蛋白酶17(MMP-17)酶联免疫试剂盒
鸡胃泌素释放肽前体(ProGRP)酶联免疫试剂盒
鸡红细胞生成素受体(EPOR)酶联免疫试剂盒 
鸡线粒体乙醛脱氢酶(ALDM)酶联免疫试剂盒