- ￥1600
- 上海雅吉生物科技有限公司
- YS111081
- 中国
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Glutamine, Gln
- 保质期：
一年
- 保存条件：
4℃避光
- 库存：
10
- 供应商：
雅吉生物
- 规格：
50管/48样
测定意义：
谷氨酰胺（Glutamine）是构成人体蛋白质所必需的20种氨基酸之一。是人体内最普遍的、不可缺乏的条件性必需氨基酸，是构成蛋白质不可缺少的氨基酸之一，更是某些细胞培养中最基本的元素。由于谷氨酰胺不稳定的特性，在细胞培养基的整合中，易自发性分解为谷氨酸和氨离子，而氨离子对细胞的毒性很强，因此，在细胞培养体系中，须密切关注谷氨酰胺的储存寿命（SHELF LIFE）和实时监测。
测定原理：
在谷氨酰胺酶（Glutaminase）作用下，谷氨酰胺发生脱氨基反应，产生谷氨酸（glutamic acid）和氨离子；
谷氨酰胺+H2O———————谷氨酸+NH4+
然后用显色剂进行显色，显色后在570nm下进行测定。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：液体50mL×2瓶，4℃保存；
试剂二：液体1.5ml×1瓶，-20℃保存；
试剂三，粉剂×1瓶， 4℃保存；临用前加入10mL蒸馏水，充分混匀溶解，用不完的试剂仍 4℃保存
谷氨酰胺提取：
1、细菌或培养细胞样品：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议1000万细菌或细胞加入2mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.2g组织，加入2mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）或细胞培养液样品：按照血清（浆）或细胞培养液体积（mL）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议取0.2mL血清（浆）或者细胞培养液加入2mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
谷氨酰胺含量测定试剂盒（分光光度法）测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
2、 在有盖EP管中加入下列试剂：
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管1 | 对照管2 |
| 样本 | 1000 | 1000 | |
| 试剂一 | 1000 | ||
| 试剂二 | 10 | 10 | 10 |
混匀，37℃水浴30min（盖紧，以防止水分散失），
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管1 | 对照管2 |
| 试剂三 | 200 | 200 | 200 |
90℃水浴20min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却，于570nm波长处比色，
△A=A测定管 - A对照管1 - A对照管2。对照管2只要做一管。
谷氨酰胺含量计算：
1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0074x- 0.5255；x为谷氨酰胺含量（µg/mL），y为吸光值。
2、按照血清（浆）或者细胞培养液体积计算
谷氨酰胺含量(μg/mL)= [(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V3×V1÷V2）=1351×(△A+0.5255)
3、按照蛋白浓度计算
谷氨酰胺含量(µg/mg prot)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V1×Cpr)=135.1×(△A+0.5255) ÷Cpr
4、按照样本质量计算
谷氨酰胺含量(µg/g鲜重)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(W ×V1÷V2)=270.2×(△A+0.5255) ÷W
5、按照细菌或细胞密度计算
谷氨酰胺含量(μg/104 cell)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(1000×V1÷V2)=0.27×(△A+0.5255)
V1：加入反应体系中样本体积，1mL；V2：加入提取液体积，2 mL；V3：加入血清（浆）或细胞培养液体积，0.2 mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；1000：细菌或细胞总数，1000万。
注意：
1、该试剂盒仅适用于发酵液或组织中谷氨酰胺含量测定，检测下限为100µg/mL。
2、标准曲线线性范围为：100µg/mL -600µg/mL。
3、ΔA线性范围为：0.01-2；若大于2则需要将上清液用试剂一稀释至适当倍数后测定，计算公式中乘以相应稀释倍数。谷氨酰胺含量测定试剂盒（分光光度法）
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文献和实验(7)式或(9)式可计算叶绿素总量。 叶绿体色素的提取液中除含有叶绿素a与b外，还含有叶黄素和胡萝卜素，因为叶黄素和胡萝卜素的吸收光谱均在蓝光区，故不会干扰叶绿素含量在红光区的分光光度法测定。 器材与试剂 722分光光度计，叶绿体色素提取所需器材。 方法与步骤 1. 提取叶绿素。 2. 测定光密度。 在1cm比色杯中，注入叶绿素提取液(浓度大时需稀释)。另以叶绿素提取介质作为参比溶液注入同样的比色杯中。根据实验要求，选用相应的波长(测总量选用652nm，测叶绿素a、b含量
吸收峰。据此所测得的吸光度值代人不同的经验公式（见结果计算），计算出叶绿体色素丙酮（或乙醇）提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度，并依据所使用的单位植物组织（鲜重、干重或面积），求算出色素的含量。 [ 实验目的 ] 掌握分光光度法对植物叶绿体色素提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度测定与计算方法，以及植物材料中各种色素含量的求算方法。 [ 器材和试剂 ] 1 ．植物材料 新鲜（或烘干）植物叶片，如菠菜叶片等。 2 ．实验
、45.6为叶绿素a、b在波长645nm时的比吸收系数。解方程式（1）（2），则得：此时，CT为总叶绿素浓度，CA 、CB为叶绿素a、b的浓度，单位为每升毫克，利用上面（3）（4）（5）式，即可以计算a、b总叶绿素的浓度。二、仪器药品 扭力天平 剪刀 研钵 移液管 漏斗 大试管 丙酮 碳酸钙 石英砂 721型分光光度计（如有其他精密型号的分光光度计则更好）三、实验步骤 1、提取叶绿素从植株上选取有代表性的叶片数张，于扭力天平上称取0.1g鲜重，剪碎后置于研钵中，加蒸馏水5－6ml，碳酸钙少许及适量
