溴化乙锭溶液(10 mg/ml)报价

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名称：*化乙锭溶液(10 mg/ml)报价
规格：1ml
英文名：EB(10 mg/ml in water)
产地：国产|进口
编号：SY0250
品牌：百奥莱博
本品为10mg/ml的*化乙锭储存液，用于电泳检测时，工作浓度为0.5μg/ml。*化乙锭，英文名Ethidium bromide，缩写EB，一种DNA嵌入剂，可插入DNA/RNA中，其插入双链RNA、双链DNA后荧光强度分别增强21倍、25倍，因此在低浓度（10μg/ml）染色后无需脱色，是分子生物学常用的一种核酸染料、移码诱变剂、DNA/RNA酶抑制剂。*化乙锭已用于核酸的许多荧光分析，还可结合到单链 DNA（虽然强度不高）和三链 DNA 上。另外，EB可与吖啶橙结合用于区分存活的、凋亡和坏死的细胞。

CAS：1239-45-8
分子式：C21H20BrN3
分子量：394.31
外观：红色液体

使用方法

一、胶染法（电泳前染色）
1. 制胶时加入EB 核酸染料使其工作浓度0.5μg/ml（每50mL 琼脂糖溶液中加入2.5μL 10mg/ml EB水溶液）。
2. 按照常规方法进行电泳。

注意事项

1) 此方法比较节省染料，250 μL（10mg/ml）染料大约可以做100块50mL的胶。
2) EB兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
3) 胶染法不适合预制聚丙*(代"烯")酰胺凝胶，对于聚丙*(代"烯")酰胺凝胶请使用泡染法。
4) 在染料的存在下，线状双链DNA的迁移率减小了15%。

二、泡染法（电泳后染色）

1.按照常规方法进行电泳。
2.室温下将电泳后的凝胶在含有EtBr (0.5ug/ml)的电泳缓冲液或水中浸泡30-45min。
3.（可选）对于检测较小量DNA（＜10ng），可将EB染色后的凝胶于水或1mM MgSO4 中室温脱色20min，从而降低因未结合EB引起的背景荧光信号。

储存条件：室温避光，有效期两年。

更多有关*化乙锭溶液(10 mg/ml)报价的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·通用型动物组织PCR试剂盒
编号：SY0049
英文名称：Animal Tissue Direct PCR Kit
规格：50T|200T
该试剂盒可用于转基因型鉴定、动物基因分型等多种大规模基因检测。动物组织直接PCR试剂盒是一种可直接对不同动物组织进行PCR扩增的试剂盒，适应性广、稳定性强。试剂盒中采用独特的裂解缓冲液体系，可以简便快速的裂解多种动物组织样品并释放出基因组DNA。整个过程不需要除去蛋白、RNA及其它次生代谢物，也无需有机溶剂抽提，即可得到质量稳定的基因组DNA，无需后续纯化步骤即可直接用于PCR反应。而且样品需求量小，少到5mg动物组织即可进行实验。

试剂盒中提供的 2×Tissue Master Mix 具有很强的扩增兼容性，能直接以待测样品裂解液为模板，进行高效特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合物，包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分，并以dUTP替代了dTTP，另外加入了能够降解含有dUTP 模板的 UNG 酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR产物，UNG 酶对不含有尿嘧啶的模板不会造成任何影响，从而保证扩增的特异性和准确性，防止了大规模基因检测时可能出现的PCR产物污染问题。优化的2×Tissue Master Mix与直接裂解液配合使用能够快速简便地对样品进行检测，并具有灵敏度高、兼容性强、特异性强、稳定性好等特点。

产品组分：

 

组分	50T	200T	储存
2×Tissue MasterMix*	500 μl	1 ml×2	-20℃
Buffer AL	5 ml	20 ml	室温或4℃
Protease	220 μl	880 μl	4℃
6×DNA Loading Buffer	1.5ml	1.5ml	4℃

注：2×Tissue Master Mix中包含Tissue Taq DNA 聚合酶、UNG酶、dNTP（dUTP替代了dTTP）、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂和稳定剂。

保存方法
① 本试剂盒的2×Tissue Master Mix保存在-20℃，避免反复冻融。
② Buffer AL在常温干燥条件下，可保存12个月，如需保存更长时间可置于4℃。
③ Protease溶液具有独特配方，常温保存（25℃）可长期具有活性，在4℃保存，其活性和稳定性会更好，因此建议将其置于在4℃保存，请勿置于-20℃保存。

注意事项
1）本试剂盒适用于常规PCR，请勿用于多重PCR鉴定；建议扩增片段在1kb以内。
2）注意实验用具的清洁以及实验的操作手法，避免样本间的交叉污染。
3）建议采用新鲜采取的动物组织，若为长期冷冻组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板的降解，影响PCR效率。
4）Buffer AL若低温保存，容易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间，也可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀，混匀后再使用。
5）电泳检测时，切勿使用含有 SDS 的 Loading Buffer，否则在电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带，影响实验结果。
6）建议设立阳性及阴性对照反应。阳性对照可用50ng纯化的动物DNA为模板，阴性反应以ddH2O为模板，引物可采用以前成功扩增的引物。
7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法

1. 取5-10mg动物材料，置于离心管中。尽量剪碎动物材料，以使之后的酶解反应容易进行。
2. 取100μl Buffer AL并加入4μl Protease，涡旋混匀。
3. 向混合液中加入动物组织，涡旋混匀。
4. 65℃孵育10-30min，然后95℃处理5min。
【注】：65℃孵育，一般只需10min即可满足多数PCR需求。若需要的DNA量较大或样品较难酶解，可以将时间延长至30min。组织块不需完全酶解，残余的部分在后续离心步骤中可被除去。
5. 12,000 rpm (~13,400×g )离心5min。
6. 转移上清至新的离心管，4℃或-20℃放置备用或直接用于PCR扩增。
【注】：用于后续PCR检测时，模板量占PCR体系的1-10%之间最佳，不能超过20%。如50μl 的PCR体系中，加入0.5-5μl 裂解液即可，但不能超过10μl。
7. PCR反应体系配制*
按照下表配制PCR反应体系，配置好反应体系后，短暂涡旋充分混匀并瞬时离心，将所有试剂收集到管底。

ddH2O	Up to 20μl
2×Tissue Master Mix	10μl
正向引物（10μM）	0.5μl
反向引物（10μM）	0.5μl
模板 DNA	xμl

【*】：① 配制的PCR反应体系可根据所需终体系（如50μl）按照该比例进行调整。
② 通常引物终浓度为0.2-0.25μM可以得到较好结果。反应性能较差时，可以在0.1-0.5μM范围内调整引物浓度。
8. PCR反应条件设置
此表PCR反应条件仅供参考。PCR反应条件因模板、引物等的结构条件不同而各异。具体操作中需要根据模板类型、目的片段大小、扩增片段的碱基序列和引物的GC含量及长短等具体情况来优化最佳的反应条件，包括退火温度，延伸时间等。

循环步骤	温度	时间	循环数
UNG酶处理	50℃	5min	1
灭活UNG酶&预变性	94℃	5min	1
变性	94℃	10sec	30-40循环
退火a	50-65℃	20sec
延伸b	72℃	30 sec/kb
彻底延伸	72℃	5min	1

【注】：a. PCR程序中的退火温度需根据引物的Tm值自行设置；
b. 延伸时间需要根据片段的长度来确定，对于1kb以内的DNA片段，建议延长时间为30秒。


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