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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输,4℃避光保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Ethidium Bromide Solution
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
1.5 mL
溴化乙锭溶液,10mg/mL本产品是浓度为10 mg/mL的溴化乙锭水溶液。它可以直接加入到溶化的琼脂糖凝胶中(终浓度为0.5 μg/mL)用于核酸的电泳染色,也可以用于核酸的PAGE电泳后染色。
常温运输,4℃避光保存、有效期一年。
溴化乙锭溶液,10mg/mL产品及特点
由于血液富含RNase,因此血液RNA非常容易降解,是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题,本公司在非冻型组织RNA保存液的基础上,开发了本产品,它具有下列特点:
1. 能快速渗透到新鲜血液细胞内,抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常温可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3个月。
2. 操作简单,直接将本产品和新鲜血液细胞沉淀按比例混合即可。
3. 适用于人新鲜血和哺乳动物新鲜血液,不适用于陈旧血液和冻凝血液,也不适用于禽类血液和其他动物血液。
4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。
5. 保存的样品可直接用本公司血液RNAout提取RNA。
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文献和实验用缓冲液补充。 (4) 使溶液冷却至60℃。加入溴化乙锭(用水配制成10mg/ml的贮存液)到终浓度为0.5ug/ml,充分混匀。 (5) 用移液器吸取少量琼脂糖溶液封固胶模边缘,凝固后,在距离底板0.5-10mm的位置上放置梳子,以便加入琼脂糖后可以形成完好的加样孔。如果梳子距玻璃板太近,则拔出梳子时孔底将有破裂的危险,破裂后会使样品从玻璃板之间渗透。 (6)将剩余的温热琼脂糖溶液倒入胶模中。凝胶的厚度在3-5mm之间。检查一下梳子的齿下或齿间是否有气泡
,此时可见白色絮状沉淀,此即DNA粗制品。 5.用玻棒捞起DNA沉淀,放入小烧杯中,用70%乙醇洗涤沉淀一次,洗涤时动作要轻,防止DNA被切断。 6.沉淀取出放入一干净的塑料离心管中,用lmlTE缓冲液溶解。 7.在lmlDNA溶液中加入10mg/ml的RNA酶20μl,使最终浓度达到200μg/ml,37℃保温30分钟。 8.加入20%SDS25μl,使最终浓度至0.5%;加入0.5mol/l EDTA30μl至20mmol/l;加10mg/ml蛋白酶K20μl,使最终浓度为200μg/ml,50
dye) 0.25%溴酚蓝 0.25%二甲苯青 40%(W/V)蔗糖 (6)溴化乙锭(EB) 10mg/ml (7)琼脂糖agarose(电泳级) (8)DNA分子量标记物:Lambda HindⅢ DNA markers 3. 仪器设备和消耗品 电泳仪、电泳槽、样品梳、微波炉、水浴锅、移液器(10μl,200μl,1000μl)、离心管、一次性枪头(200μl,1000μl)。 四. 实验步骤 1. DNA样品的制备 采集生物检测样本,在弱碱和螯合剂存在条件下进行组织
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