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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
912
- 英文名:
Lentivirus Luciferase Reporter negative control
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括慢病毒报告基因阴性对照品牌在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:慢病毒报告基因阴性对照品牌
英文名:Lentivirus Luciferase Reporter negative control
品牌:百奥莱博
规格:50μl×4管;2×10e7TU/ml
编号:SY0151
产地:国产|进口
质粒图谱

注意事项
1)病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。
2)病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。
3)操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次*酸*溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次*酸*溶液浸泡1h以上后弃去。
4)用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜处观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。
5)病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-80℃。
欲咨询购买慢病毒报告基因阴性对照品牌,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·TOP10化学感受态细胞
编号:SY0011
英文名称:TOP10 Chemically Competent Cell
规格:100μl×10管
本品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。本品使用pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
TOP10感受态细胞基因型:F-mcrA △(mrr-hsd RMS-mcr BC) 80lacZ△M15 △lac X74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (Strr) endA1 nupG
储存条件:-80℃
组份:
TOP10感受态细胞 100μl×10
pUC19(0.1 ng/μl) 5μl
注意事项
1)感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2)整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3)为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。
4)为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,最低化实验可能遇到的风险。
使用方法
1)取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
【注】:一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用,应注意所用的DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
2)向100 μl感受态细胞悬液中加入目的DNA,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30min。
3)将离心管置于42℃水浴中放置60-90 s,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2-3min,该过程不要摇动离心管。
4)向离心管中加入900μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养45 min(150 rpm), 目的是促使菌体复苏,抗性基因表达。
5)将离心管内容物混匀,吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,37℃培养12-16 h。
【注】:涂布菌液多少可根据转化DNA量来调整。如果预计的克隆较少,可通过离心后吸除部分培养液,重新悬浮菌体后将其涂布在一个平板上。剩余菌液可置于4℃保存,一周之内可重新涂板。
慢病毒报告基因阴性对照品牌关键词:慢病毒报告基因阴性对照,Lentivirus Luciferase Reporter negative control,SY0151
·二甲基腔肠素
编号:SY0242
英文名称:Coelenterazine 2-methyl
规格:1×50μg
本品为粉末形式供应的二甲基腔肠素,系天然腔肠素衍生物,具有无毒、细胞膜通透性等特性,是一种细胞强抗氧化剂,可高效作用于细胞内的活性氧,如单态氧和超氧阴离子。由于氧化应激是细胞凋亡过程的中介环节,因此,二甲基腔肠素可能作为一种研究细胞凋亡的重要工具。另,二甲基腔肠素还可通过化学发光法来检测超氧阴离子和过氧亚硝酸阴离子水平。
腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。因此,腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光,细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号,因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平。
腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET),利用此特性,当与荧光蛋白如GFP的突变体(增强的黄色荧光蛋白,EYFP)联合使用,在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光,能量随之转移到EYFP上,发出绿光(~530nm)。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估,适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外,由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量,适用于高通量筛选如药物开发。
更为重要的一个功能,水母发光蛋白复合物(Aequorin)由22kDa的水母蛋白(Apoaequorin protein)、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子(Ca2+)与该复合物结合后,腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。正是此Ca2+依赖性的反应过程(见图1),使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比,其主要具有以下几个优点:
1)能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM;
2)样品无自体荧光,背景荧光低于使用荧光*离子指示剂;虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱,但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的灵敏度。
3)水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内,使其能够进行数小时至数天的*离子监测。

图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程
目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素(Coelenterazine native),另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验,但是由于其发光波长,细胞膜渗透性,光量子效率上的差异,使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。
英文别名:Coelenterazine, 2-methyl analog; Methyl Coelenterazine; 2-methyl Coelenterazine
CAS:N/A
分子式:C20H17N3O2
分子量:331.37
溶解性:溶于甲醇或乙醇
外观:黄色粉末
纯度:>98%(TLC)
结构:

注意事项
1)二甲基腔肠素粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气,在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃,长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入,也可能造成二甲基腔肠素氧化失活,使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
慢病毒报告基因阴性对照品牌关键词:慢病毒报告基因阴性对照,Lentivirus Luciferase Reporter negative control,SY0151
DNaseⅠ溶液(1mg/ml) 1ml|5ml
ARB13187 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)代做ELISA实验 Mouse insulin-like growth factor binding protein 1,igfbp-1 ELISA KIT
NF-213 羊抗人C5血清
ARB11034 人妊娠特异性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)Elisa分析 Human pregnancy specificβ1glycoprotein,sp1/psβ1-g ELISA KIT
F050320 大鼠IgG抗体 Rats IgG
BL1363 RNAse A溶液(10mg/ml )
白蛋白检测试剂盒(*甲*(代"酚")紫比色法) 100T
CYB164024 羊抗牛IgG(1:500~1000)-HRP
T104 Taq Platinum DNA Polymerase
HC0327 芬兰Thermo
ARB13399 羊阶段特异性表面抗原-3(SSEA-3)检测服务 Sheep ssea-3 ELISA KIT
PY02-173 汉克氏液 100克
ARB13930 猪肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)酶标法分析 Porcine pulmonary surfatcant-associated protein a,sp-a ELISA KIT
BL1316 2×Pfu PCR MasterMix(不含染料)
北京百莱博科技有限公司是报告基因检测产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购慢病毒报告基因阴性对照品牌。
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PHI/Ca2+/AMPK 信号通路的激活。TRPA1 抑制剂 HC030031 预处理显著抑制了 PHI 诱导的 P-AMPK 和 P-CaMKⅡ增加,并显著减少了 PHI 诱导的 Ca2+荧光。PHD2 shRNA 组中 TRPA1 蛋白水平显著高于对照组。这些结果强烈表明 TRPA1 在 PHD 诱导的 Ca2+释放途径中发挥着至关重要的作用。 图 3 慢病毒介导的特异性 shRNA 对 PHD2、RyR2 和 IP3R 的敲低效果。 案例 3:慢病毒递送高灵敏度的报告基因
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