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- NobleRyder
- N0310
- 北京
- 2025年12月26日
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- 文献和实验
- 技术资料
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99
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12个月
- 供应商：
北京诺博莱德科技有限公司
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已收到实际货物为准
产品简介：
分离纯化完整的RNA对于分子生物学的下游实验极其重要，也是进行基因表达分析的基础。从革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌中提取RNA的方法需要蛋白酶消化和有机溶剂抽提去除蛋白质，核酸消化去除DNA。革兰阳性菌裂解缓冲液主要由Tris-HCl、氯化钠、SDS等组成，临用前加入蛋白酶K至终浓度100μg/ml。
产品组成：
| 编号 名称 |
N0310 | Storage |
| 革兰阳性菌裂解缓冲液 | 100ml | RT |
| 使用说明书 | 1份 | |
操作步骤(仅供参考)：
1、 取适量的革兰阳性菌裂解缓冲液，加入蛋白酶K使其终浓度为100μg/ml，待用。
2、 取10ml培养物，4℃ 12000g离心10min，弃上清。
3、 重悬菌体于0.5ml含有蛋白酶K的革兰阳性菌裂解缓冲液，在干冰或其他低温中冻结。
4、 解冻并超声30W 3次，每次10～15s，37℃温育60min。
5、 进行酚氯仿异戊醇等方法抽提。
注意事项：
1.如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
革兰阳性菌裂解缓冲液
有效期：12个月有效。
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，但能改变分离的速度，电压升高，迁移速度变快，分离所用时间变短，实验中采用30kV电压。 2.6 有机溶剂对分离的影响 在缓冲液体系中，使用有机添加剂可改变被分离物与胶束的相互作用和替考拉宁各组分在胶束相中的分配系数。向运行缓冲液中加入乙腈可加快分离速度，但对分离的效果影响并不显著，因此本实验未加入有机溶剂。 2.7 检测限 以替考拉宁中含量最高的A2�2组分为实验样品，信噪比S/N=3为指标，测得本方法的最低检测限为0.2%。 2.8 精密度试验
酸根离子可分别与蛋白的羧基及氨基结合。通过调整缓冲液的pH值，酸性及碱性氨基酸可选择性地与此树脂结合，改变缓冲液的盐浓度可将蛋白洗脱分离。资料显示，使用这种方法能使两种等电点、分子量和疏水性相同的蛋白很好分离。亲和纯化方面，Sigma发展了利用FLAG标签的纯化方法，FLA G序列为N—AspTyrLysAspAspAspAsp-Lys-C，分子量小且亲水性，与其融合表达的蛋白不易形成包涵体，活性也不受影响，用该公司抗FLA G抗体亲和树脂即可纯化目的蛋白。蛋白质分离纯化的一般程序蛋白质纯化技术指南蛋白
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