北京现货ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)厂家

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北京现货ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)厂家的品牌：百奥莱博，是优质的蛋白质研究产品，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京现货ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)厂家
规格：1盒
英文名：Western blotting(Mouse IgG)
品牌：百奥莱博
编号：QN1158
产地：国产|进口
本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色，含有HRP标记抗小鼠IgG二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，加入发光底物后，能让胶片感光。经显影和定影后，可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。

试剂盒组分：
封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
HRP标记小鼠IgG二抗——————0.3ml，效价1:500～1000
ECL显色液-——————————25mlA+25mlB

常规电泳转膜后:
1)清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜放入封闭液内，置摇床孵育，室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次5min。
3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量，按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口，37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次10min。
8)根据用量，取ECL发光液A、B等量混匀，加在膜正面，暗室显色1～5分种。倾去显色液，小心用纸吸去显色液，在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片，做好标记，轻轻的放在膜上，显色30秒到1分钟，取出胶片浸入显影液中，观察显色情况，再放入定影液中1分钟。根据条带强弱，再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
注意事项：
1.请根据一抗来源选择试剂盒。
2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果
条带过弱，可增加抗体浓度，可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3.TBS-T(0.01M，PH7.6)配制方法：称取NaCl 8.5g，Tris 1.21g，用800ml的双蒸水溶解，用盐*(代"酸")调PH到7.6，再加入0.5ml Tween-20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)

储存条件：-20℃避光，有效期一年。

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·EB染色剂
编号：QN1023
英文名称：Ethidium bromide
规格：100mg|1g
EB是一种高灵敏度的荧光染色剂，常用于观察PAGE或琼脂糖凝胶中的核酸，合成DNA及RNA的抑制剂及诱变剂，分离和测定核酸结构。

CAS号：1239-45-8
分子式：C21H20BrN3
分子量：394
纯度(无水)：＞98.0%
熔点：260～262℃
性状：深红色结晶或粉末
溶解性：溶于水(10mg/ml)，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中.
储存条件：常温

·四乙基*化铵
编号：QN0578
英文名称：Tetraethylammonium bromide
规格：100g
CAS号：71-91-0
别名：*化四乙铵;四乙*铵
分子式：C8H20BrN
分子量：210.16

·甜菜碱
编号：QN0730
英文名称：Betaine
规格：10g
本品常用作甲基供体，也可用作PCR增强剂。

别名：甜菜素;三甲铵乙内酯;甘*酸三甲胺内盐
CAS号：107-43-7
分子式：C5H11O2N
分子量：117.15
纯度：≥98％
性状：白色或类白色粉末
储存条件：2～8℃

·EDTA二*盐
编号：QN0718
英文名称：Ethylenediaminetetraacetic acid disodiu*(代"m") salt ,dihydrate
规格：500g|1kg|5kg
本品是二价阳离子的螯合剂，能抑制酶的活性，例如金属蛋白酶，因为金属蛋白酶需要二价阳离子的存在才有活性。

CAS号：6381-92-6
分子式：C10H14N2O8Na2·2H2O
分子量：372.24
纯度：＞99.0%
性状：白色结晶性粉末
储存条件：室温

0.5M EDTA(pH=8.0)的配制：
称取EDTA-Na2.2H2O186.1g溶于800mL体积纯水中，加入19g*氧化*，然后用NaOH调节pH至8.0，后定容。高压灭菌后使用。

注意事项：
(1)EDTA-Na2.2H2O不易溶于水，只有在碱性条件下才能溶解，pH调至8时才能够完全溶解。
(2)注意调节终体积溶液pH为8.0。


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·D-赖*酸
编号：QN0278
英文名称：D-Lysine
规格：1g
别名：D-赖*酸;D-赖*酸碱
CAS号：923-27-3
分子式：C6H14N2O2
分子量：146.19
储存条件：−20℃

·菠萝蛋白酶 酶活50万U/g
编号：QN0400
英文名称：D-Lysine
规格：500g
菠萝蛋白酶是从凤梨属植物-菠萝中经生物工程技术提取精制而成的一组巯基水解蛋白酶，其分子量为33000，等电点为9.55。菠萝蛋白酶主要来源于植物茎中，故也称为茎菠萝蛋白酶。菠萝蛋白酶的主要成分是一种含巯基的蛋白酶，同时还包含过氧化物酶、酸性磷酸酯酶、几种蛋白抑制剂和有机活性*，其活性中心为巯基(—SH)，能进行各种蛋白质水解，进行生化反应，可广泛应用于食品、医药及生物等行业。

CAS号：9001-00-7
储存条件：常温干燥
酶活：50万U/g

产品特点：
l 菠萝蛋白酶来源于天然植物，具有安全无毒、作用范围广等特点。
l 采用先进的生物工程技术：经微滤、超滤、膜分离及真空冷冻干燥制成，产品质量达到食品级和医药级标准，并通过国家出口食品生产企业卫生标准认证。

应用领域：
1.菠萝蛋白酶是一种天然的、无毒、无副作用的蛋白质，作为一种巯基水解蛋白酶，可以进行蛋白质的水解，将蛋白质分子肽链水解生成多肽或*基酸，形成具有独特风味的蛋白质水解液;
2.菠萝蛋白酶已被证明是一种安全有效的治疗药物，在医药领域它可以阻止血小板凝集，纤维蛋白溶解，消炎作用，抗肿瘤作用，细胞因子和免疫调节作用，皮肤清创，促进其他药物的吸收，粘液溶解作用，帮助消化作用，促进伤口愈合，改善心血管和循环系统。菠萝蛋白酶能被很好的口服吸收，资料表明，在高剂量下，它的治疗效果会更好。

酶活力定义：
紫外光分光度法：在测定条件(37±0.2℃;PH值7.0)每分钟水解酪蛋白释出的三*乙酸可溶物在275nm波长有吸光度与1微克酪*酸的吸光度相当时，所需的酶量即为一个活力单位，用u/g表示。

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