北京高纯质粒大提试剂盒厂家

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京高纯质粒大提试剂盒厂家，产品信息：

类别：DNA纯化

英文名：PlaPure Maxi Extraction Kit

产品名	产品编号	包装规格
高纯质粒大提试剂盒	WE0164	10次

产地：国产|进口

品牌：百奥莱博

编号：WE0164

规格：10次

  本试剂盒提供一种简单、快捷、高效的提取质粒的方法，在碱裂解法裂解细胞的基础上，采用独特的硅基质膜吸附技术和试剂配方，通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的质粒DNA，经过两步洗涤，一步洗脱，最大限度的去除蛋白质、基因组、RNA和其他杂质。得到的DNA可直接用于PCR、酶切、测序、连接等生物学实验。

 

试剂盒组成：

 

组份	50次
Buffer P1	125ml
Buffer P2	125ml
Buffer P3	125ml
Buffer PB	30ml
Buffer PW(浓缩液)	50ml
Buffer EB	30ml
RNase A(10 mg/ml)	2ml
吸附柱DQ及收集管	10套
离心管(50ml)	10个

 

自备试剂：无水乙醇，异丙醇。

 

实验前准备及重要注意事项/strong>：

1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，更长时间保存可置于2～8℃，加入RNase A的Buffer P1 置于2～8℃可稳定保存6个月。

2、第一次使用前，将RNase A溶液全部加入到Buffer P1 中，混匀，置于2–8℃保存，使用前需在室温中放置一段时间，恢复至室温后使用。

3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。

4、使用前请先检查Buffer P2 、Buffer P3、Buffer PB是否出现结晶或沉淀，如有结晶或沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清(请勿剧烈晃动Buffer P2)。

5、注意不要直接接触Buffer P2 和Buffer P3，使用后应立即盖紧盖子。

6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。

7、所有离心步骤均可在室温下进行。

 

操作步骤：

1、取150ml过夜培养的菌液加入离心管(自备)中，12000×g离心3分钟收集细菌，尽量吸弃全部上清。

注意：质粒拷贝数较低或>10 kb时，可以使用更多菌液通过二次离心将菌体沉淀收集到同一个离心管中，同时后续所加试剂Buffer P1、P2及P3的量需按比例加倍。所加试剂的量必须能够充分裂解菌体，菌体过多、裂解不充分都会降低质粒的提取效率。

2、向留有菌体沉淀的离心管中加入12ml Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A)，使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮细菌沉淀。

注意：如果菌块未彻底混匀，将会影响裂解效果，使提取量和纯度偏低。

3、向离心管中加入12ml Buffer P2，温和地上下颠倒混匀6-8次，充分混匀使菌体裂解，室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。

注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组DNA，造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。并且此步骤所用时间应不超过5分钟，避免质粒受到破坏。

4、向离心管中加入12ml Buffer P3，立即上下颠倒混匀6-8次，充分混匀，此时出现白色絮状沉淀，室温放置5分钟。12000×g离心10分钟。

注意：Buffer P3 加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。

5、取上清加入新的离心管(自备)中，向上清中加入11ml异丙醇，上下颠倒混匀。

6、将步骤5中的混合溶液转移到已装入收集管的吸附柱DQ中。12000×g离心2分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

注意：吸附柱的最大容积为15ml，所以第5步中所得溶液分多次过柱。如果离心机转子倾角较大时，建议加入吸附柱的溶液体积不超过10ml，以防发生漏液现象。

7、向吸附柱中加入2.5ml Buffer PB，12000×g离心2分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

8、向吸附柱中加入10ml Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，12000×g离心2分钟，倒掉收集管中的废液。

9、重复步骤8。

10、将吸附柱重新放回收集管中，12000×g离心5分钟，倒掉废液，将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。

注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。

11、将吸附柱置于一个新的收集管中，向吸附膜的中间部位加入1-3ml Buffer EB，室温放置2-5分钟，12000×g离心5分钟，将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。

注意：

1)为了增加质粒的回收效率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，12000×g离心5分钟，将质粒溶液收集到离心管中。

2)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液，应保证其pH值在7.0-8.5范围内(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0会降低洗脱效率。

3)质粒拷贝数较低或>10 kb时，Buffer EB在65-70℃水浴预热，适当延长吸附和洗脱的时间，可以增加提取效率。

 

储存条件：室温(15～30℃)

北京高纯质粒大提试剂盒厂家专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：WE0164,PlaPure Maxi Extraction Kit,高纯质粒大提试剂盒

我公司位于北京市海淀区，是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材研发、销*(代"售")、服务为一体的生物科技公司，公司主要经营的进口品牌包括Sigma,Invitrogen,Roche,Abcam,BD, R&D,GE,Amresco,Merck等；产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材等。百奥莱博秉承博采众长、诚信为本、德行天下的宗旨服务于客户。公司合作单位及客户包括各大医院、科研机构、大专院校、制药单位、医学检验单位、卫生防疫、生物技术公司、食品单位等诸多领域，正逐步成长为一流的生化试剂和耗材供应商。 我们将一如既往的为您提供优质的产品和完善的售后服务。

关于北京高纯质粒大提试剂盒厂家的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

编号	类别	名称
WE0216	核酸电泳和回收	50×TAE
WE0195	RNA纯化	miRNA提取试剂盒
WE0194	RNA纯化	病毒RNA提取试剂盒
WE0391	二抗	AP标记山羊抗兔IgG(H+L)
WE0212	工具酶	蛋白酶K
WE0371	生物素化抗体	生物素化驴抗人IgG(H+L)
WE0110	核酸扩增(PCR)	2×Babuddy MasterMix(含染料)
WE0266	蛋白质研究	His标签蛋白纯化试剂盒(包涵体蛋白)
WE0378	二抗	罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
WE0377	HRP标记抗体	HRP标记山羊抗人IgA
WE0311	蛋白质研究	Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)
WE0208	DNA纯化	磁珠法血液DNA提取试剂盒
WE0214	工具酶	溶菌酶
WE0331	免疫检测	抗GST标签琼脂糖介质
WE0359	FITC标记抗体	FITC标记兔抗人IgG(H+L)
WE0157	核酸扩增(PCR)	miRNA cDNA第一链合成试剂盒
WE0346	一抗	抗GFP标签单克隆抗体
WE0227	其他分子生物学试剂	人类cDNA
WE0185	DNA纯化	血块基因组DNA提取试剂盒
WE0302	蛋白质研究	定影粉
WE0193	RNA纯化	超纯RNA提取试剂盒(DNase I)
WE0285	蛋白质研究	0.5 M Tris-HCl缓冲液(pH6.8)
WE0222	其他分子生物学试剂	无毒RNA酶清除剂
WE0126	核酸扩增(PCR)	防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)
WE0104	核酸扩增(PCR)	2×Bes Taq MasterMix(含染料)

 

我公司生产供应销*(代"售")的DNA纯化产品正全系列现货促销，满分期待您的垂询选购北京高纯质粒大提试剂盒厂家。