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- 百奥莱博
- 北京
- WE0182-AVN
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温(15～30℃)
- 保质期：
长期
- 英文名：
Marine Animal DNA Extraction Kit
- 库存：
484
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京促销水产动物基因组提取试剂盒价格在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。
名称：北京促销水产动物基因组提取试剂盒价格
编号：WE0182
英文名：Marine Animal DNA Extraction Kit
品牌：百奥莱博
规格：50次
本试剂盒适合于从多种水产动物(如鱼类、虾类、贝类等)组织中提取总DNA。纯化过程不需*酚或*仿等有机溶剂，无需乙醇沉淀。本试剂盒采用优化的缓冲体系使裂解液中的DNA高效特异的结合到硅胶质离心吸附柱上，其他污染物可流过膜，蛋白、PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步有效的洗涤步骤被有效去除，最后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| Buffer GTL | 15ml |
| Buffer GL | 15ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自备试剂：无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，Buffer GTL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、如果下游实验对RNA污染比较敏感，可以在加入Buffer GTL后加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225S。
不同水产动物组织提取得率：
| 样本 | 建议孵育时间 | DNA得率 |
| 贝类组织 | 0.5 h | 12-20μg |
| 虾组织 | 1 h | 8-14μg |
| 鱼组织 | 1 h | 15-40μg |
操作步骤：
1、取不超过30 mg组织材料，液氮充分研磨后，放入离心管(自备)中，加入200μl Buffer GTL，涡旋振荡15秒。
注意：
1)根据提取的组织不同，起始量也有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20 mg。
2)如需去除RNA，可在上述步骤完成后，加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(货号：WE0225S)，震荡混匀，室温放置5-10分钟。
2、加入20μl 蛋白酶K ，涡旋混匀，简短离心，使管壁上的溶液收集到管底。56℃孵育，直至组织完全溶解，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
注意：不同组织裂解时间不同，通常需0.5-2小时即可完成。对于难裂解组织可以适当延长孵育时间。
3、加入200μl Buffer GL，充分颠倒混匀，70℃孵育10分钟，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
注意：加入Buffer GL时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
4、加入200μl无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能出现絮状沉淀，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
5、将步骤4所得到的溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm(～～13400×g)离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤7。
8、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管中，向吸附柱中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤9所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤9；若洗脱体积小于200μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件：室温(15～30℃)。
欲了解更多北京促销水产动物基因组提取试剂盒价格的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:
·T4 DNA聚合酶
编号：WE0238
英文名称：T4 DNA Polymerase
规格：150U|750U
本产品是由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。由于T4 DNA聚合酶同时具有5’→3’ DNA聚合酶活性和3’→5’ DNA外切酶活性，可以用于将5’端突出末端补平或3’端突出末端削平，也可用于通过置换反应进行标记DNA探针合成、通过引物伸长法解析mRNA转录的起始点、定点突变过程中第二链的合成以及不依赖于连接反应的PCR产物克隆等。本T4 DNA聚合酶的3’→5’ DNA外切酶活性比Klenow Fragment要高约100-1000倍，且对于单链DNA要比双链DNA活性更高。本酶不含5’→3’DNA的外切核酸酶活性，于70℃加热10分钟可使其失活，金属离子螯合剂可以抑制其活性。
·定影粉
编号：WE0302
英文名称：Fixing Powder
规格：20套
本产品是由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。由于T4 DNA聚合酶同时具有5’→3’ DNA聚合酶活性和3’→5’ DNA外切酶活性，可以用于将5’端突出末端补平或3’端突出末端削平，也可用于通过置换反应进行标记DNA探针合成、通过引物伸长法解析mRNA转录的起始点、定点突变过程中第二链的合成以及不依赖于连接反应的PCR产物克隆等。本T4 DNA聚合酶的3’→5’ DNA外切酶活性比Klenow Fragment要高约100-1000倍，且对于单链DNA要比双链DNA活性更高。本酶不含5’→3’DNA的外切核酸酶活性，于70℃加热10分钟可使其失活，金属离子螯合剂可以抑制其活性。
·高保真多重PCR Mix(下一代测序用)
编号：WE0125
英文名称：HiFi PCR Mix for NGS
规格：1ml|5ml
本品是由热启动酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系，具有高保真性、高延伸性、低偏好性的特点，对复杂的DNA模板(如高GC含量模板)有均衡的扩增效率，特别适合于二代建库中多重PCR的扩增。
本品所含的高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，扩增范围更广泛。本产品有效提升了基因组中高GC或高AT区域的扩增效率，降低扩增偏好性从而提高测序覆盖度。
产品组成：
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×HiFi PCR Mix | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意事项：
1、该产品不适用于有修饰的引物。
2、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
3、避免反复冻融，反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。
使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 |
| 2×HiFi PCR Mix | 25μl |
| Primer Pool | 0.1 -0.3μM |
| DNA or cfDNA | 5ng-100ng |
| ddH2O | up to 50μl |
注意：引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 2 min | |
| 变性 | 98℃ | 20 s | 30-40 个循环 |
| 退火延伸 | 65℃ | 90 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件：-20℃，避免反复冻融。
北京促销水产动物基因组提取试剂盒价格关键词：WE0182,Marine Animal DNA Extraction Kit,水产动物基因组提取试剂盒
·FITC标记山羊抗人IgG(H+L)
编号：WE0362
英文名称：Goat Anti-Human IgG, FITC Conjugated
规格：100μl
本产品为FITC(硫*酸荧光素)标记的经亲和纯化的山羊抗体，特异识别人IgG重链和轻链，其检测灵敏度高，本底低。经本荧光抗体染色的标本，在荧光显微镜下观察呈现明亮的绿色荧光。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学、细胞化学、流式细胞分析等研究，在临床检验上也用于细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。
免疫原：人IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：对于大多数实验(1：50-200)
·Protein A+G琼脂糖凝胶
编号：WE0268
英文名称：Protein A+G Agarose
规格：1ml
本产品为Protein A和Protein G 共价交联到Agarose beads上的产物，并保存在20%乙醇溶液中。本产品包含1ml protein A+G agarose和1ml 20%乙醇溶液，即为50%悬浮介质。主要用于免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)。免疫沉淀抗体包括Mouse IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgA，Rat IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c，Rabbit IgG，Rabbit and Goat polyclonal Abs，以及Human IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。本产品也可以用于抗体的纯化。
注意事项：
1、本产品保存在2～8℃ 20%的乙醇中，从低温取出后恢复到室温后装柱，避免产生气泡影响柱效。
2、使用前请充分颠倒若干次使混合均匀。
使用方法：
I 免疫沉淀(Immunoprecipitation，IP)：
1、蛋白样品的准备：
a. 对于细胞样品，用1×PBS洗涤一次。2×106细胞加入200μl细胞裂解液，以此类推。
b. 对于组织样品约20 mg加入200μl组织蛋白抽提试剂，以此类推。
注：如果裂解获得的蛋白样品浓度过高，可以用裂解液或PBS适当稀释；如果蛋白样品浓度过低，可适当减少裂解液的用量。
2、取约200μg至1 mg蛋白样品，与0.2μg至2μg纯化后的抗体混合，4℃缓慢摇动过夜。
3、取20-40μl充分重悬的Protein A+G Agarose加入到一支新的1.5ml离心管中，短暂离心，小心吸弃上清。
4、加入500μl 1×PBS洗涤Protein A+G Agarose，短暂离心，小心吸弃上清。重复此步骤2次。
5、将步骤2的抗原抗体复合物加入到洗涤后的Protein A+G Agarose中，4℃孵育1-3个小时，短暂离心，小心吸弃上清。
6、加入500μl 1×PBS洗涤，短暂离心，小心吸弃上清。重复此步骤2次。
7、向沉淀中加入20-40μl 2×SDS-PAGE电泳上样缓冲液，涡旋重悬沉淀，短暂离心把样品离心至
8、蛋白煮沸变性5分钟，短暂离心后取部分或全部上清，用于SDS-PAGE电泳或Western Blot等。暂时不用的样品可在-20℃保存。
II 免疫共沉淀(CO-IP)：
参考免疫沉淀的方法进行，但免疫共沉淀(CO-IP)通常必须使用未经冻存的新鲜蛋白样品。普通的免疫沉淀虽然可以使用冻存的蛋白样品，但以用新鲜的蛋白样品为佳。
储存条件：2～8℃，避免冻存。
北京促销水产动物基因组提取试剂盒价格关键词：WE0182,Marine Animal DNA Extraction Kit,水产动物基因组提取试剂盒
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文献和实验相关实验
以下操作按照天根产品 DP322 口腔拭子基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 口拭子2. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml），2 ml离心管3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机注意：为了保证样本不被食物或者饮料污染，取样前 30 min内请勿进食和饮水。实验准备-试剂盒准备：使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶
以下操作按照天根产品 DP320 新型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头（10 μl ，200 μl ，1ml），1.5 ml离心管4. 无水乙醇5. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机实验准备-试剂盒准备：使用前先在漂洗液PW和LP3中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技（北京）有限
以下操作按照天根产品 DP305 植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 巯基乙醇3. 移液器及配套无菌枪头（10 μl， 200 μl ，1ml），1.5 ml离心管4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，实验准备-试剂盒准备1：使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。实验准备-试剂盒准备2：准备实验时，将缓冲
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