北京现货高效热启动DNA聚合酶哪里买

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货高效热启动DNA聚合酶哪里买，产品信息：

类别：核酸扩增(PCR)

英文名：SuperStar DNA Polymerase

产品名	产品编号	包装规格
高效热启动DNA聚合酶	WE0123	500U|2500U

规格：500U|2500U

产地：国产|进口

品牌：百奥莱博

英文名：SuperStar DNA Polymerase

  本产品是一种采用最新封闭技术的Taq DNA Polymerase，适用于HotStart PCR。在70℃以下，酶的活性中心被完全封闭，有效抑制了聚合酶活性，并能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。在95℃条件下孵育5分钟后，酶的部分活性得以释放。随着热循环的不断进行，剩余的酶活会源源不断地释放出来，这就使得此酶克服了常规Taq酶容易出现平台期的弊端，其扩增效率大大提高。

  本品进行PCR扩增时，PCR产物3"末端附有一个“A”碱基，可直接用于T/A克隆。本产品具有扩增速度快、特异性好、稳定性好的特点，主要应用于对扩增产物要求量大的PCR和RT-PCR反应。

 

产品组成：

 

组份	500U	2500U
SuperStar DNA Polymerase，5 U/μl	100μl	5×100μl
10×PCR Buffer	1.8ml	5×1.8ml

注意：本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。

 

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

 

质量控制：

1、经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；

2、经检测无外源核酸酶活性；

3、PCR方法检测无宿主残余DNA；

4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。

 

使用方法：

以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

 

1、PCR反应体系

 

试剂	50μl反应体系	终浓度
10×PCR Buffer	5μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50 μ l
SuperStar DNA Polymerase，5 U/μl	0.5μl	2.5 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意： 可以在室温下配制反应液，最好将试剂置于冰上。引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

 

2、PCR反应条件

 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	5 min
变性	94℃	0.5-1 min	25-35个循环
退火	50-68℃	0.5-1 min
延伸	72℃	1 min
终延伸	72℃	10 min

 

注意：

1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。

2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的SuperStar DNA Polymerase的延伸速率为1 kb/min。

3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

 

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

北京现货高效热启动DNA聚合酶哪里买专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：高效热启动DNA聚合酶,SuperStar DNA Polymerase,WE0123

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编号	类别	名称
WE0134	核酸扩增(PCR)	SuperSYBR Mixture(低含量ROX校正染料)
WE0294	蛋白质研究	Western Ladder笔
WE0114	核酸扩增(PCR)	2×BaHF MasterMix(含染料)
WE0275	蛋白质研究	Bradford蛋白定量试剂盒
WE0249	克隆与表达	TA快速连接试剂盒(pUC-T)
WE0137	核酸扩增(PCR)	一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒
WE0167	DNA纯化	高效无内毒素质粒大量提取试剂盒
WE0207	DNA纯化	磁珠法唾液DNA提取试剂盒
WE0318	蛋白质研究	柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液，100×)
WE0143	核酸扩增(PCR)	快速实时荧光定量PCR预混体系(高含量ROX校正染料)
WE0149	核酸扩增(PCR)	一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒(低含量ROX校正染料)
WE0267	蛋白质研究	His标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白)
WE0136	核酸扩增(PCR)	SuperSYBR Mixture(不含ROX校正染料)
WE0178	DNA纯化	细菌基因组DNA提取试剂盒
WE0235	基因结构和功能	双链DNA荧光定量试剂盒
WE0307	蛋白质研究	低背景ECL化学发光检测试剂盒
WE0173	DNA纯化	植物基因组DNA提取试剂盒
WE0278	蛋白质研究	蛋白快速染色液
WE0181	DNA纯化	酵母基因组DNA提取试剂盒
WE0395	DNA纯化	口腔拭子DNA样本保存管
WE0216	核酸电泳和回收	50×TAE
WE0190	DNA纯化	通用型柱式DNA提取试剂盒
WE0378	二抗	罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
WE0247	克隆与表达	TA快速连接试剂盒(pUC-T Simple)(含载体，连接酶)
WE0310	蛋白质研究	TBST(pH8.0,10×)
WE0213	工具酶	DNase I(不含RNase)
WE0289	蛋白质研究	SDS-PAGE上样缓冲液(非还原，5×)
WE0184	DNA纯化	唾液基因组DNA提取试剂盒

 

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