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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
参照说明书
- 保质期:
参照说明书
- 英文名:
OneStep Ahead RT-PCR Kit (2000)
- 库存:
1
- 供应商:
北京博蕾德生物科技有限公司
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文献和实验Ligase-mediated(overnight)T4 DNA ligase Original TA Cloning® Kit •≥80% recombinants K2000-10 K2030-10 •Blue/white color screening
在论坛上看到不停地有人在问RT-PCR的问题,实际上在以前的帖子中各位香主和eeflying(我为什么总是提他们?因为还是很佩服的哦,生怕自己说错了,被他们指出来哦)都谈到了很多,鄙人也充大头答了一些问题,但是还是有各种问题,由于的基因表达还有点实战经验(但也技止此而),所以想些点东西给大家参考,计划把包括RNA酶保护分析,northernblot,原位杂交,半定量RT-PCR和定量RT-PCR都写了,但是实在时间不够,我从来不写综述的,写这么多还是头一次,声明一下,全部文字均为原创(当然如有
有两种做法:条件具备的话可用kit进行一步法进行;若条件不太好的话可分两步进行逆转录再PCR。但后来发现两步法的结果更加理想,条带特异性强且无拖尾现象,我推测是体系更加单一比较利于PCR的进行,当然也可能是我买的kit不太好。(promega)。2.RT-PCR应具备的条件高质量的RNA(保留后可做5‘,3’RACE);引物的(最好产物短点);若涉及粗略定量的话还应考虑RNA的浓度或是cDNA的浓度(如果由内标分子更好,但我发现其实很不容易将RNA的浓度以及内标分子的表达量调整的完全一样);体系
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