北京呼吸道合胞病毒A亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)促销

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北京呼吸道合胞病毒A亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多呼吸道合胞病毒A亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)等病毒PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京呼吸道合胞病毒A亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)促销
等级：科研试剂
品牌：百奥莱博
规格：48次/盒

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·猪源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号：SYA304
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA439
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒
本试剂盒适用于检测气管分泌物拭子、肺组织等样本中传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)DNA，用于传染性胸膜肺炎放线杆菌的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

本试剂盒用一对传染性胸膜肺炎放线杆菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对猪传染性胸膜炎放线杆菌核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

试剂盒组成：

 

组份	数量	规格
APP荧光qPCR反应液(APP-qPCR MIX)	1管	720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
阳性对照(APP-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：
 样品的采集与预培养按照《牛传染性胸膜肺炎病原分离鉴定》(SNT1376.1-2004)要求进行。
➤粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
➤病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。

二、DNA提取：
 可按常规方法提取，也可采用商品化试剂盒提取DNA。
➤培养物：取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μLDNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μLDNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
➤其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(APP-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	15µL	N×15µL

2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

四、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(APP-PTC)：均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
3．结果判定
➤在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明APP核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明APP核酸阴性。
➤如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行APP qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明APP核酸阳性；否则判为样本阴性。

五、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


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F010101 小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg
PY02-408  HC琼脂基础  250克  
HC0075 吸头
寡聚脱氧胸苷纤维素 VB2
D0402 脱纤维马血(无菌 袋装) 500ml/1000ml/2000ml
刚果红染色液(1%)   100ml
ARB11151 人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)ELISA代测服务 Human tumor specific growth facter/tumor supplied group of factor,tsgf ELISA KIT
ARB10378 人甘露糖凝集素受体(MBLR)含量测试 Human mannma binding lectin receptor,mblr ELISA KIT
葡聚糖凝胶QAE-A50 Protein protectant AEP-HBC 83382-89-2
N-乙酰-L-异亮*酸 DL-5-HTP 3077-46-1
柠檬酸铋 Potassium sulfate 813-93-4
BL1335 通用引物 ITS4
4-甲基儿茶酚 Ferric phosphate dihydrate 452-86-8
ARB11049 人表面活性蛋白A(SP-A)代做ELISA实验 Human surfactant protein a,sp-a ELISA KIT
73049-39-5 小牛胸腺DNA DNA(calf thymus)
PY01-030  胰酶粉(1:3500)  250|100克  
9068-59-1 中性蛋白酶
BL0791 大鼠IgG抗原(干粉)
F030106 HRP标记兔抗牛酪蛋白抗体 Rabbit Anti-casein*HRP
真菌蛋白提取试剂盒(2D电泳用)   50T|100T
BL0805 山羊IgG抗原干粉(原装)
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·冠状病毒(OC43)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA181
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鹅源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA299
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA494
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、原理
该试剂盒适用于检测气管分泌物试子、肺组织等样本中牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)，用于牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)感染的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(40T/Kit)
组份 数量 规格
IBRV反应液(IBRV-qPCR MIX) 1管 800μl/管
核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5ml/管
酶混合物(Enzymes Mix) 1管 40μl/管
阴性对照(NTC) 1管 250μl/管
IBRV阳性对照(IBRV-PTC) 1管 50μl/管

四、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

五、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为12个月。

六、样本采集、前处理与DNA提取
6.1 样本采集
病死或扑杀动物，无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品；活动物灭菌棉试子沾取气管分泌物，放入无菌试管中。
6.2 样本前处理：
组织样本：每份组织分别从3个不同的位置称取样本约1g，手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5ml生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5ml灭菌离心管，8000rpm离心2min，取上清液100μl于1.5ml灭菌离心管。
6.3 DNA提取
6.3.1 对于上述处理好的样本加入等体积的核酸提取液(固体标本加入50μl核酸提取液)，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mlEP管，-20℃保存；
6.3.2 DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接去4μl加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的制备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(IBRV-qPCR MIN)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 20μl N×20μl
酶混合物 1μl N×1μl
总量 21μl N×21μl
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入21μl荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(IBRV-PTC)4μl，10000rpm瞬时离心10s。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件：
预变性 1循环 94℃ for 2 min
PCR扩增 40循环 94℃ for 15 sec
55℃ for 30 sec
在55℃延伸时收集荧光信号。报告基因：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判断
(1)阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(IBRV-PTC)：均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3结果判定
(1)在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明IBRV核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明IBRV核酸阴性。
(3)如果Ct值＞35，判为可以样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行IBRV qPCR检测。如果重复扩增曲线为为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明IBRV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配制、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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