北京现货肠产毒性大肠杆菌耐热肠毒素(ST-elt)荧光PCR

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括北京现货肠产毒性大肠杆菌耐热肠毒素(ST-elt)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)批发在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：北京现货肠产毒性大肠杆菌耐热肠毒素(ST-elt)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)批发
编号：SYA090
等级：科研试剂
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：48次/盒

我公司的北京现货肠产毒性大肠杆菌耐热肠毒素(ST-elt)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)批发，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·诺如病毒G1型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA201
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·小肠耶尔森菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA024
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·口蹄疫(FMDV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA556
等级：科研实验专用
规格：10次/盒|48次/盒

·高致病性猪蓝耳病毒(hp-PRRSV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA560
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(竞争法)(注：竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)
编号：SYA651
等级：科研实验专用
规格：192次/盒

·猪链球菌/脑膜炎奈瑟菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA113
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鸡源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA293
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对鸡源性成分特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用荧光PCR技术对鸡源性成分DNA进行体外扩增检测。本试剂盒中鸡源性成分的探针报告基团为FAM。

二、用途
该试剂盒适合于各种饲料及其它样品中鸡源性成分的检测。

三、试剂盒组成(48T)
组成成分 数量 规格
鸡物种荧光qPCR反应液(Chicken-qPCR MIX) 1管 720μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Chicken-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Bio-Rad系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
样品的采集按照国家标准《饲料中牛羊源性成分的定性检测定性聚合酶链式反应(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求进行。
6.2 DNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Chicken-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Chicken-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(Chicken-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明鸡源性成分核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明鸡源性成分核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行鸡源性成分qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明鸡源性成分核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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BTN130672 核糖核酸酶RNase If RNase If
PY02-199  曙红亚甲基蓝琼脂  250克  
ARB14130 小鼠总胆红素(TB)尿液中含量检测 
2′-脱氧鸟苷-5′-二磷酸三*盐 2-IP 102783-74-4
58-85-5 D-Biotin(Vitamin H)   D-生物素
ARB11212 人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)检测服务 Human cytochrome p450c21/21-hydroxylase,cyp21a ELISA KIT
BTN120700 利福平溶液 Rifampicin Solution
ARB13675 兔血纤蛋白原(Fbg)酶标法分析 Rabbit fibrinogen,fbg ELISA KIT
CYB164036 兔抗羊IgG(1：500～1000)-HRP
蒽醌 Puromycin dihydrochloride 84-65-1
DNA Marker（100-600bp） 100次
ARB10470 人白介素1(IL-1)含量测试 Human interleukin 1,IL-1 ELISA KIT
β-胡萝卜素 Oxyvanadium phthalocyanine 7235-40-7
F040401 乙肝表面抗原 HBSAg
ARB11595 人晚期氧化蛋白产物(AOPP)代做ELISA实验 Human advanced oxidation protein products,aopp ELISA KIT
DL3000 DNA Marker Urokinase
ARB11160 人鱼精蛋白1(PRM1)含量分析 Human protamine 1,prm1 ELISA KIT
盐*(代"酸")壮观霉素 CMC 22189-32-8
尼罗蓝指示剂   100ml
CYB163063 兔抗狗IgG-FICT
苋菜红 Testosterone 915-67-3
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·乙型流感病毒(IFVB-V1)分型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA196
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·副伤寒杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA012
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Bacillus paratyphosus
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪传染性萎缩性鼻炎(SAR)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA441
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Bacillus paratyphosus
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·登革热病毒Ⅰ型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA225
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Bacillus paratyphosus
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·副猪嗜血杆菌(HPS)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA486
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Bacillus paratyphosus
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对副猪嗜血杆菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对副猪嗜血杆菌核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适用于检测气管分泌物拭子、肺组织、关节液等样本中的副猪嗜血杆菌(HPS)，用于副猪嗜血杆菌(HPS)感染的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：

 

组份	数量	规格
HPS反应液(HPS-qPCR MIX)	1管	672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX)	1管	48μL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
HPS阳性对照(HPS-PTC)	1管	50μL/管

四、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

五、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品采集
病死或扑杀猪，无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品；生猪灭菌棉拭子沾取气管分泌物，放入无菌试管中；若有关节囊肿，在囊肿表面常规碘酊消毒，用2mL或5mL灭菌注射器穿刺，无菌吸取1-2mL关节渗出液。
6.2 样品前处理
组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中；关节渗出液：直接取100μL进行提取。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入40uL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(HPS-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	14µL	N×14µL
酶混合物	1µL	N×1µL
总量	15µL	N×15µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(HPS-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1）阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2）阳性对照(HPS-PTC)：均产生扩增曲线。
（3）以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1）在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明副猪嗜血杆菌核酸阳性。
（2）Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明副猪嗜血杆菌核酸阴性。
（3）如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4）对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行副猪嗜血杆菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明副猪嗜血杆菌核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1）初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2）所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3）PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4）样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5）试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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